[发明专利]基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法在审
申请号: | 201410149074.1 | 申请日: | 2014-04-14 |
公开(公告)号: | CN103901031A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 王晓力;王永刚;曾玉峰;朱新强;王春梅;张茜;路远;王慧;汪晓斌;杨晓 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人: | 郭官厚 |
地址: | 734099 甘肃省兰*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:将多糖测定液和浓硫酸同时添加到微孔板中,多糖水解成单糖并迅速脱水形成糠醛衍生物;微孔板中继续添加苯酚,苯酚与糠醛衍生物反应生成橙黄色液体,反应温度为90℃、时间为23min,反应完成后再进行5min冷却处理;在酶标仪中于490nm下测定多糖的光吸收值;以葡萄糖溶液为标准液,绘制标准曲线,将多糖的光吸收值带入标准曲线中计算多糖含量。本发明的有益之处在于:方法简单、快速、灵敏、重复性好,颜色持久,对每种糖仅制作一条标准曲线;对于杂多糖,在没有必要细致划分各种单糖的情况下,可以一次测出总量;可用于甲基化的糖、戊糖以及寡糖类和多聚糖的测定。 | ||
搜索关键词: | 基于 硫酸 苯酚 快速 通量 测定 多糖 含量 方法 | ||
【主权项】:
基于硫酸苯酚快速高通量测定多糖含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将多糖测定液和浓硫酸同时添加到微孔板中,在浓硫酸的作用下多糖水解成单糖并迅速脱水形成糠醛衍生物;(2)向微孔板中继续添加苯酚,苯酚与糠醛衍生物反应生成橙黄色液体;(3)在酶标仪中于490nm下测定多糖的光吸收值;(4)以葡萄糖溶液为标准液,绘制标准曲线;(5)将多糖的光吸收值带入标准曲线中计算多糖含量。
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