[发明专利]一种花叶玉簪快速增殖的方法

摘要

本发明涉及一种花叶玉簪快速增殖的方法，主要通过外植体的选择及消毒、继代增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，特别是在继代过程中，提高了光照强度，延长了光周期，降低了培养温度，同时采用了转换继代培养基的技术手段，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、增殖系数高的优良效果。

主权项

一种花叶玉簪快速增殖的方法，其特征在于，包括：(1)外植体的选择及消毒：于3‑4月挖取玉簪根茎，洗净后种植在以珍珠岩为基质上的花盆中，栽植过程中只浇灌自来水，30天后取萌发芽做为外植体；浸于盛有饱和肥皂水的烧杯中5‑10分钟，再用自来水冲洗到基本无泡沫，然后再重复上述浸泡冲洗步骤一次；在超净台中先用70％的酒精浸泡1分钟，无菌水冲洗2次，用含有两滴吐温80的5％次氯酸钠溶液消毒10‑15分钟，无菌水冲洗5次；再用含有两滴吐温80的0.1％的升汞消毒10‑15分钟，用无菌水冲洗6次；(2)接种培养：将步骤(1)所述的外植体，剥去外层叶片，切取带有潜伏芽的根茎块接种到接种培养基中，每瓶一块；培养温度为24±1℃，12h/d的光周期，光照强度2000Lx左右，培养3‑7天开始生长，所述接种培养基为1/2MS+6‑BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L，PH6.2；(3)增殖培养：将不污染的外植体转入第一代增殖培养基中使芽增殖，所述第一代增殖培养基为MS+6‑BA2‑5mg/L+NAA0.2‑0.5mg/L+蔗糖30g/L，PH6.2；培养温度为20±1℃，光照强度4000‑6000Lx，光周期14‑18h/d；培养120‑150天后，将外植体转入第二代增殖培养基中，所述第二代增殖培养基为MS+6‑BA0.5‑1.5mg/L+NAA0.1‑0.2mg/L+蔗糖30g/L，PH6.2；培养温度24±1℃，光照强度2000Lx，光周期10‑12h/d；培养30天左右；(4)生根培养：将增殖培养得到的小芽转入生根培养基中，将较大的芽竖向劈开一分为二再转入生根培养基中，所述生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg\L+蔗糖20g/L，PH6.2，培养温度为24±1℃，12h/d的光周期，光照强度2000Lx左右，20天左右生根，当根长达到3cm左右出瓶；(5)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗6d，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的基质中，温度控制在24‑26℃，前7d湿度控制在70％左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下，炼苗移栽期间适当遮光，使光照强度为自然光的50％。