[发明专利]一种消症丸制剂的指纹图谱检测方法

摘要

本发明公开了一种消症丸制剂的HPLC指纹图谱检测方法，该方法包括供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、各原料药与成品之间的相关性的测定；用高效液相色谱仪测定，以参照峰保留时间和峰面积为1，计算供试品相对保留时间和相对峰面积，即得消症丸制剂HPLC指纹图谱。由此方法得到的消症丸制剂HPLC指纹图谱在254nm下归属于柴胡、香附、大黄、川芎、莪术、当归、白芍、浙贝母、王不留行和青皮的特征峰分别有4个、4个、17个、7个、5个、7个、11个、4个、6个、11个。经实验验证表明，本发明提供的指纹图谱检测方法，灵敏度和精密度高，稳定性和重复性好，相似度高，可以客观、全面、准确的评价该消症丸制剂的质量，对保证临床药效具有重要意义。

主权项

一种消症丸制剂的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： （1）供试品溶液的制备：取消症丸制剂内容物细粉1.0g，精密称定，置50ml锥形瓶中，精密加入浓度为90%乙醇溶液50ml，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，静置放冷，过滤，滤液减压回收乙醇，浓缩，上AB‑8大孔吸附树脂柱，分别用400ml水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇，按每小时3～4倍柱体积的流速洗脱，合并40%、60%、80%、95%乙醇洗脱液，减压浓缩，加甲醇定容至10ml，吸取溶液，过0.45μm滤膜，取续滤液，即得； （2）对照品溶液的制备：精密称取芍药苷、阿魏酸、橙皮苷、大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚适量，加甲醇使溶解，分别制成芍药苷浓度为36μg/ml、阿魏酸浓度为56.3μg/ml、橙皮苷浓度为42μg/ml、大黄酸浓度为24.6μg/ml、大黄素浓度为29.8μg/ml、芦荟大黄素浓度为51.6μg/ml、大黄素甲醚浓度为38.6μg/ml、大黄酚浓度为26μg/ml的对照品溶液； （3）消症丸制剂HPLC指纹图谱的测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各50μl，进样，用高效液相色谱仪测定，以参照峰保留时间和峰面积为1，计算供试品相对保留时间和相对峰面积，即得消症丸制剂HPLC指纹图谱； 色谱条件为：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：A相为乙腈，B相为0.3％磷酸水，梯度洗脱；检测波长：245nm～254nm；柱温35℃～45℃；流速0.8ml/min～1ml/min。