[发明专利]一种消症丸制剂的指纹图谱检测方法

说明书

优先权 

对于本申请，申请人要求在中国申请的专利，申请日为2013年7月30日，申请号为201310325229.8的优先权。 

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的质量检测方法，具体涉及一种消症丸制剂的指纹图谱检测方法。 

背景技术

消症丸是由河南中医学院老中医赵俊学老师在明代张介宾《景岳全书》中柴胡疏肝散的基础上，根据乳腺增生病的发病机理加减而成，在临床中应用几十年，对乳腺增生症的疗效确切。该方由柴胡、香附、大黄、青皮、川芎、当归、白芍、莪术、土鳖虫、浙贝母、王不留行十一味药材组成，具有舒肝行气、活血化痰、软坚散结的功效。主治气滞血瘀痰凝所致的乳腺增生病。症见乳房肿块，乳房胀痛或刺痛，可伴胸胁疼痛，善郁易怒，胸闷，脘痞纳呆，月经量少色暗，经行腹痛。舌暗红或有瘀点、瘀斑，苔薄白或白腻。脉弦或涩。 

现有检测方法(专利ZL201110058699.3)对该产品中柴胡、香附、大黄、青皮、浙贝母、白芍6味药材进行薄层鉴别以及对大黄药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进行HPLC含量测定。该方法步骤繁琐，且消症丸制剂由十一味药材组成，仅仅测定其中的一味药材含量不足以全面对该复方的制剂的质量进行控制。现有方法没有对其中主要多味药材中的化学成分进行全面、系统的检测，因此不能全面监控中间体、成品的质量。 

近年来，中药指纹图谱技术已日渐成熟，能够很好的控制药品的质量，保证药品的有效性和质量可控性，已经成为一种业内公认的、可靠的、高效的技术手段，是中药质量控制的发展趋势。 

因此，为了更全面、有效的控制该消症丸制剂的质量，提高其质量控制水平，让临床用药安全及疗效更加有所保证，很有必要在现有技术的基础之上研究设计出一种能客观、准确，全面检测消症丸制剂质量的指纹图谱测定方法。 

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种通过HPLC指纹图谱对消症丸制剂进行检测的方法，本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种精密度高，重复性和稳定性好，能客观、全面、准确的评价消症丸制剂质量的指纹图谱检测方法，能更有效的保证成品的质量，对控制 消症丸制剂的质量具有重要作用。该方法采用HPLC梯度洗脱在一个流动相系统首次同时检出复方中十味药材成分，从色谱峰的特征和相似度结果判断消症丸制剂的样品合格与否，从整体上全面反映消症丸所用药材内在质量，不仅能全面反映消症丸制剂成品的质量，还可根据成品、半成品的指纹图谱变化追根溯源寻找工艺操作中的问题。本发明还提供了消症丸制剂的标准指纹图谱。 

技术的方案：为了实现以上目的，本发明的通过HPLC指纹图谱对消症丸制剂进行检测的方法包括如下步骤： 

（1）供试品溶液的制备：取消症丸制剂内容物细粉1.0g，精密称定，置50ml锥形瓶中，精密加入浓度为90%乙醇溶液50ml，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，静置放冷，过滤，滤液减压回收乙醇，浓缩，上AB-8大孔吸附树脂柱，分别用400ml水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇，按每小时3～4倍柱体积的流速洗脱，合并40%、60%、80%、95%乙醇洗脱液，减压浓缩，加甲醇定容至10ml，吸取溶液，过0.45μm滤膜，取续滤液，即得； 

（2）对照品溶液的制备：精密称取芍药苷、阿魏酸、橙皮苷、大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚适量，加甲醇溶解，分别制成芍药苷浓度为36μg/ml、阿魏酸浓度为56.3μg/ml、橙皮苷浓度为42μg/ml、大黄酸浓度为24.6μg/ml、大黄素浓度为29.8μg/ml、芦荟大黄素浓度为51.6μg/ml、大黄素甲醚浓度为38.6μg/ml、大黄酚浓度为26μg/ml的对照品溶液； 

（3）消症丸制剂HPLC指纹图谱的测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各50μl，进样，用高效液相色谱仪测定，以参照峰保留时间和峰面积为1，计算供试品相对保留时间和相对峰面积，即得消症丸制剂HPLC指纹图谱； 

色谱条件为：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：A相为乙腈，B相为0.3％磷酸水，梯度洗脱；检测波长：245nm～254nm；柱温35℃～45℃；流速0.8ml/min～1ml/min。 

色谱条件的筛选：本发明分别对色谱柱、洗脱系统、洗脱程序、柱温、检测波长进行了筛选。