[发明专利]一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物及高GC含量基因的PCR扩增方法在审

专利信息
申请号: 201410120471.6 申请日: 2014-03-27
公开(公告)号: CN103981172A 公开(公告)日: 2014-08-13
发明(设计)人: 潘海波;邢楠楠;谢阳;华琴 申请(专利权)人: 江苏佰龄全基因生物医学技术有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 南京正联知识产权代理有限公司 32243 代理人: 卢霞
地址: 225300 江苏省泰*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明提供了一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物,其特征在于,所述的扩增添加剂选自7-deaza-dGTP、甜菜碱或甜菜碱类似物、DMSO、甘油、甲酰胺和聚乙二醇中的2种或2种以上的组合。本发明与现有技术相比,具有如下技术效果:1)应用本发明中所述的PCR添加剂及扩增方法,可以扩增模板GC含量大于80%的目的基因,可以成功扩增复杂基因用于临床检测。2)应用本发明PCR扩增产物特异性高,条带单一,无需纯化,可直接用于后续操作。3)应用本发明的PCR方法对DNA聚合酶要求低,可与各类商业化PCR试剂盒相匹配。
搜索关键词: 一种 用于 gc 含量 基因 pcr 扩增 添加剂 组合 方法
【主权项】:
一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物,其特征在于,所述的扩增添加剂选自7‑deaza‑dGTP、甜菜碱或甜菜碱类似物、DMSO、甘油、甲酰胺和聚乙二醇中的2种或2种以上的组合,所述的7‑deaza‑dGTP的工作浓度为0.05‑0.2mmol/L,所述的甜菜碱或甜菜碱类似物的工作浓度为0.05‑0.5mol/L,所述的DMSO的工作浓度为1‑10%(v/v),所述的甘油的工作浓度为1‑20%(v/v),所述的甲酰胺的工作浓度为1‑10%(v/v),所述的聚乙二醇的工作浓度为1‑20%(v/v)。
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