[发明专利]一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物及高GC含量基因的PCR扩增方法在审
申请号: | 201410120471.6 | 申请日: | 2014-03-27 |
公开(公告)号: | CN103981172A | 公开(公告)日: | 2014-08-13 |
发明(设计)人: | 潘海波;邢楠楠;谢阳;华琴 | 申请(专利权)人: | 江苏佰龄全基因生物医学技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人: | 卢霞 |
地址: | 225300 江苏省泰*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物,其特征在于,所述的扩增添加剂选自7-deaza-dGTP、甜菜碱或甜菜碱类似物、DMSO、甘油、甲酰胺和聚乙二醇中的2种或2种以上的组合。本发明与现有技术相比,具有如下技术效果:1)应用本发明中所述的PCR添加剂及扩增方法,可以扩增模板GC含量大于80%的目的基因,可以成功扩增复杂基因用于临床检测。2)应用本发明PCR扩增产物特异性高,条带单一,无需纯化,可直接用于后续操作。3)应用本发明的PCR方法对DNA聚合酶要求低,可与各类商业化PCR试剂盒相匹配。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 gc 含量 基因 pcr 扩增 添加剂 组合 方法 | ||
【主权项】:
一种用于高GC含量基因的PCR扩增添加剂组合物,其特征在于,所述的扩增添加剂选自7‑deaza‑dGTP、甜菜碱或甜菜碱类似物、DMSO、甘油、甲酰胺和聚乙二醇中的2种或2种以上的组合,所述的7‑deaza‑dGTP的工作浓度为0.05‑0.2mmol/L,所述的甜菜碱或甜菜碱类似物的工作浓度为0.05‑0.5mol/L,所述的DMSO的工作浓度为1‑10%(v/v),所述的甘油的工作浓度为1‑20%(v/v),所述的甲酰胺的工作浓度为1‑10%(v/v),所述的聚乙二醇的工作浓度为1‑20%(v/v)。
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