[发明专利]基于多肽的黑色素瘤生物标记物的检测方法无效
| 申请号： | 201410117664.6 | 申请日： | 2014-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN104020194A | 公开（公告）日： | 2014-09-03 |
| 发明（设计）人： | 殷咏梅;李根喜;王晓盈;仇金荣 | 申请（专利权）人： | 殷咏梅 |
| 主分类号： | G01N27/26 | 分类号： | G01N27/26 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210000 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于多肽的黑色素瘤生物标记物的检测方法，其包括以下步骤：步骤一，金电极的预处理，3mm直径的金电极依次经P3000、P5000的碳化硅砂纸打磨，氧化铝粉抛光，无水乙醇和双蒸水各5min的超声清洗；步骤二，将预处理的金电极与不同浓度的黑色素瘤生物标记物S100B或生物学样本30℃温育2.5小时；同时将2.5μM信号肽溶液与氯化铜30℃条件下按浓度比1∶1温育以形成信号肽-铜离子复合物；与靶蛋白或生物学样本温育后的金电极经双蒸水冲洗，随后与信号肽-铜离子复合物溶液30℃条件下温育2.5小时，随后即可记录下铜离子的输出信号。本发明具有良好的灵敏性和特异性，并具有简单低耗等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 多肽 黑色素瘤 生物 标记 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种基于多肽的黑色素瘤生物标记物的检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤一，金电极的预处理，3mm直径的金电极依次经P3000、P5000的碳化硅砂纸打磨，1μm、0.3μm的氧化铝粉抛光，无水乙醇和双蒸水各5min的超声清洗；随后将电极浸泡在水虎鱼溶液5min及50％的硝酸30min；最后由0.5M的硫酸电化学激活金电极；经上述处理的金电极首先与50μL信号肽溶液4℃条件下孵育16小时，随后室温条件下将电极浸泡在100μMMNH溶液3小时占位，以阻断电极表面的非特异性吸附；步骤二，将预处理的金电极与不同浓度的黑色素瘤生物标记物S100B或生物学样本30℃温育2.5小时；同时将2.5μM信号肽溶液与氯化铜30℃条件下按浓度比1∶1温育以形成信号肽‑铜离子复合物；与靶蛋白或生物学样本温育后的金电极经双蒸水冲洗，随后与信号肽‑铜离子复合物溶液30℃条件下温育2.5小时，随后即可记录下铜离子的输出信号。
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