[发明专利]杜仲松脂醇二葡萄糖苷标准提取物的制备方法

摘要

本发明提供一种松脂醇二葡萄糖苷标准提取物的制备方法，包括将干燥的杜仲皮原料粉碎至20-80目，按10-15倍料液比浸提1-2h，离心机固液分离，微孔精滤，精滤液过超滤膜分离，上大孔吸附树脂吸附、洗脱，洗脱液浓缩，上C18反相硅胶柱层析纯化，层析洗脱液再上聚酰胺柱等二次层析纯化，二次层析洗脱液真空浓缩后，经冷冻干燥，制备得到不同纯度级别的松脂醇二葡萄糖苷标准提取物。本发明提取效率高，工艺适用性广，可根据杜仲健康产品不同消费市场需求，生产不同纯度等级的系列标准提取物，同时有利减少有机溶剂使用量，节能减碳，降低生产成本和减少环境污染。

主权项

 一种松脂醇二葡萄糖苷标准提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采集杜仲鲜皮，经过干燥处理，粉碎至20‑80目备用；(2)按料液重量比1：10～15倍加入浸提溶剂，超声波或微波辅助萃取或酶解提取1～2h，提取温度40～50℃，加热搅拌提取30～60min，离心机固液分离，离心液微孔精滤，精滤液过过50000Da卷式超滤膜分离；（3）上大孔吸附树脂吸附，吸附柱径高比≥1:10，流速为2BV/h，至松脂醇二葡萄糖苷穿漏点饱和吸附止，所述大空树脂为苯乙烯—二乙烯苯类大孔共聚物；（4）用浓度30%～50%的乙醇进行溶剂梯度洗脱，分段收集洗脱液，薄层点样检测，合并相同组分，真空浓缩，回收溶剂，真空冷冻干燥，得到松脂醇二葡萄糖苷标准提取物Ⅰ；（5）将步骤（4）中合并的相同组分的大孔树脂洗脱液，上C₁₈反相硅胶柱层层析，流速为2BV/h，至饱和吸附止，先后用浓度为30%的甲醇洗脱，分段收集，薄层点样检测，合并相同组分，真空浓缩，回收溶剂，真空冷冻干燥，得到松脂醇二葡萄糖苷标准提取物Ⅱ；（6）将步骤（5）中的合并的相同组分，上正相聚酰胺柱二次柱层析，流速为1.0～1.5BV/h，至松脂醇二葡萄糖苷穿漏点饱和吸附止，然后用氯仿‑乙酸乙酯溶液进行洗脱，流速0.5～1.0BV/h，分段收集洗脱液，薄层点样检测，合并相同组分，过500Da卷式纳滤膜，纳滤截留液真空浓缩，回收溶剂，真空冷冻干燥，得到松脂醇二葡萄糖苷标准提取物Ⅲ。