[发明专利]一种重组人胸腺肽α1的制备方法有效
| 申请号： | 201410060711.8 | 申请日： | 2014-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN103789321A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 苏显英;赵洪礼;王艳;林海;梁志敏;陈铮 | 申请（专利权）人： | 东北制药集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/16 | 分类号： | C12N15/16;C12N15/70;C07K14/575;C07K1/20;C07K1/16 |
| 代理公司： | 沈阳世纪蓝海专利事务所(普通合伙) 21232 | 代理人： | 谭琦 |
| 地址： | 110027 辽宁省沈*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种应用于生物制药技术领域中的重组人胸腺肽α1的制备方法，所述方法包括步骤，人工合成胸腺肽α1四串体的全基因序列，具体设计为：在天然胸腺肽α1序列前面加上核酸限制性内切酶EcoRⅠ、羟胺切割位点天冬酰胺-甘氨酸对应的核苷酸；在每两个天然胸腺肽α1序列之间加上甘氨酸对应的核苷酸；在天然胸腺肽α1序列后面加上终止密码子、核酸限制性内切酶XhoⅠ对应的核苷酸；采用双酶切方法将胸腺肽α1四串体基因克隆至pGEX-4T-2质粒相应位点，构建融合表达载体pGEX-4T-2-4Tα1，将其转化至大肠杆菌得到基因工程菌，在IPTG诱导下以包涵体形式表达。该发明采用基因工程技术制备重组胸腺肽α1，以克服化学合成成本高且污染环境，解决串联Tα1下游裂解浓度低的问题，投入少，产出高，利润空间大，作用机理独特，效果明显。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 胸腺肽 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组人胸腺肽α1的制备方法，其特征在于：所述方法包括步骤如下，（1）人工合成胸腺肽α1四串体的全基因序列，具体设计为：在天然胸腺肽α1序列前面加上核酸限制性内切酶EcoRⅠ、羟胺切割位点天冬酰胺‑甘氨酸对应的核苷酸；在每两个天然胸腺肽α1序列之间加上甘氨酸对应的核苷酸；在天然胸腺肽α1序列后面加上终止密码子、核酸限制性内切酶XhoⅠ对应的核苷酸；（2）采用双酶切方法将胸腺肽α1四串体基因克隆至pGEX‑4T‑2质粒相应位点，构建融合表达载体pGEX‑4T‑2‑4Tα1，将其转化至大肠杆菌得到基因工程菌，在IPTG诱导下以包涵体形式表达；（3）重组胸腺肽α1的制备与纯化，具体方法是：重组胸腺肽α1四串体包涵体的溶解；重组胸腺肽α1四串体的纯化；重组胸腺肽α1四串体的裂解；重组胸腺肽α1单体的纯化。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于东北制药集团股份有限公司，未经东北制药集团股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410060711.8/，转载请声明来源钻瓜专利网。
