[发明专利]一种检测孔雀石绿的核酸适配体电化学生物传感器的制备方法及应用

摘要

本发明提供了一种检测孔雀石绿（MG）的核酸适配体电化学生物传感器。该电化学生物传感器利用电极表面修饰技术，将制备的石墨烯-壳聚糖复合物和纳米金修饰到电极表面，再通过化学作用将核酸适配体接在纳米金上，通过适配体与目标物的特异性结合作用将目标物结合到电极表面 ，然后在接上目标物的抗体，构成夹心结构的生物传感器。当检测的溶液中含有目标物时，就能在电极表面固定一定量的目标物和相应的抗体，构成传感结构。由于抗体上修饰了辣根过氧化物酶（HRP），能催化过氧化氢的分解，从而产生电化学信号的变化，利用电化学信号的变化即可实现对孔雀石绿（MG）的检测。本发明制备的核酸适配体电化学生物传感器选择性强，灵敏度高，操作简单快速，适合水产品中孔雀石绿（MG）的检测。

主权项

一种检测孔雀石绿（MG）的核酸适配体电化学生物传感器，其特征在于，包括以下步骤：（1）石墨烯‑壳聚糖复合物（GR‑CS）的制备：将0.02g的氧化石墨烯（GO）分散到20ml超纯水中，超声分散8h，加入0.5ml的PSS和足量的水合肼，90℃搅拌一天，将得到的黑色分散液用水冲洗n次后，干燥得到石墨烯（G，将制得的石墨烯溶于壳聚糖中，得到1mg/ml的石墨烯‑壳聚糖复合物；（2）纳米金（AuNPs）的制备：将100ml，0.01%的HAuCl4煮沸，然后将2ml，1%的柠檬酸钠快速添加到回流的HAuCl4溶液中，当颜色由淡黄变为深红时，及得到所要制备的纳米金；（3）核酸适配体溶液的配制：用超纯水， 0.1%的DEPC一起处理过夜，第二天灭菌去除DEPC来配置DEPC水溶液；然后将核酸适配体溶入到配置的DEPC溶液中，值得均一的溶液备用；（4）检测孔雀石绿（MG）的核酸适配体电化学生物传感器的制备方法，步骤如下：取10ul的GR‑CS均一溶液修饰在玻碳电极表面，室温过夜晾干；然后滴加10ul的AuNPs，室温晾干；将核酸适配体固定在电极表面，室温晾干。