[发明专利]用于自RNA模板开始的等温DNA扩增试剂盒有效

专利信息
申请号: 201380044858.1 申请日: 2013-06-27
公开(公告)号: CN104583413B 公开(公告)日: 2018-10-19
发明(设计)人: J.R.尼尔森;R.S.杜蒂;G.A.格罗斯曼;R.C.赫勒 申请(专利权)人: 通用电气公司
主分类号: C12P19/34 分类号: C12P19/34
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 黄登高;林森
地址: 美国*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 提供了扩增RNA模板的方法。所述方法包括使用第一反应混合物,将核糖核酸(RNA)模板逆转录以形成cDNA,所述第一反应混合物包含RNA模板、能够与RNA模板杂交的至少一种引物、逆转录酶和脱氧核苷三磷酸(dNTPs);和使用第二反应混合物,扩增cDNA以形成扩增产物,所述第二反应混合物包含至少一种链置换DNA聚合酶、至少一种含肌苷的引物和能够在引物的肌苷残基的DNA 3'产生缺口的核酸酶。所述方法在等温条件下完成,无需使cDNA模板变性。也提供了定量测定样品中的RNA模板的方法和检测样品中的RNA模板的方法。也提供了用于自核糖核酸(RNA)模板扩增脱氧核酸(DNA)的试剂盒。
搜索关键词: 扩增 引物 第一反应混合物 核糖核酸 试剂盒 肌苷 链置换DNA聚合酶 脱氧核苷三磷酸 定量测定样品 等温DNA扩增 等温条件 检测样品 扩增产物 逆转录酶 核酸酶 逆转录 变性 脱氧 残基 核酸 杂交
【主权项】:
1.用于扩增核酸分子的方法,包括:使用第一反应混合物,将核糖核酸(RNA)模板逆转录以形成cDNA,所述第一反应混合物包含RNA模板、能够与RNA模板杂交的至少一种引物、逆转录酶和脱氧核苷三磷酸(dNTPs);和使用第二反应混合物,扩增cDNA以形成扩增产物,所述第二反应混合物包含至少一种链置换DNA聚合酶、至少一种含肌苷的引物和能够在引物的肌苷残基的DNA 3'产生缺口的核酸酶;其中所述方法在等温条件下完成,无需使cDNA模板变性,其中所述逆转录和扩增在单一反应混合物中进行。
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