[发明专利]用于产生单体和多聚体分子的方法及其用途

摘要

本文报道用于产生作为n聚体具有生物活性的多肽的方法，其包括编码下式(Bn‑CSo‑Is‑CSp‑FC‑CSq‑It‑CSr‑Bm)u的融合多肽的核酸，其中B表示作为n聚体具有生物活性且在缺乏融合的Fc区的情况下表达时形成非限定的聚集体/多聚体的多肽，FC表示重链Fc区多肽，CS表示切割位点，I表示间插氨基酸序列，其中FC基本上不结合Fc受体，从细胞或培养基回收融合多肽，可选地用蛋白酶切割融合多肽，从而产生作为n聚体具有生物活性且在缺乏融合的Fc区的情况下表达时形成非限定的聚集体/多聚体的多肽。

主权项

用于产生作为2聚体或3聚体具有生物活性且在缺乏融合的Fc区的情况下表达时形成非限定的聚集体/多聚体的多肽的方法，所述方法包括以下步骤：a)培养包含编码根据式II的融合多肽的核酸的细胞Bn‑CSo‑Is‑CSp‑FC1‑CSq‑It‑CSr‑Bm:FC2   (式II)其中B表示作为2聚体或3聚体具有生物活性且在缺乏融合的Fc区的情况下表达时形成非限定的聚集体/多聚体的多肽，FC1表示第一重链Fc区多肽，FC2表示第二重链Fc区多肽，CS表示切割位点，和I表示间插氨基酸序列，其中，n＝1且m＝0，或n＝0且m＝1，其中，如果n＝1，则o＝0或1，并且如果o＝0，则p＝0或1，并且如果o＝1，则p＝0，并且s＝0或1，并且q＝0，并且t＝0，并且r＝0，其中，如果m＝1，则q＝0或1，并且如果q＝0，则r＝0或1，并且如果q＝1，则r＝0，并且t＝0或1，并且o＝0，并且s＝0，并且p＝0，其中FC1和FC2通过一个或多个二硫键共价连接，其中FC1和FC2基本上不结合Fc受体；b)从细胞或培养基回收融合多肽，c)用蛋白酶切割融合多肽，并从而产生作为2聚体或3聚体具有生物活性且在缺乏融合的Fc区的情况下表达时形成非限定的聚集体/多聚体的多肽。