[发明专利]赋予酵母对乙醇和高温的耐受性的基因

摘要

描述与了鉴定赋予酵母乙醇耐受性的基因的方法、赋予乙醇耐受性的基因、以及用于鉴定这些基因的突变株。此处特指为HpETT1的基因是从多形汉逊酵母中分离的。在特指为7E的乙醇敏感突变体多形汉逊酵母菌株中HpETT1的表达互补了该突变体的乙醇敏感性。当该HpETT1的多个拷贝被整合到该基因组中并过量表达时，被转化的菌株表现了大约10倍更大的对乙醇的耐受性和对蛋白错误折叠剂AZC的耐受性。HpETT1的表达还增加了酿酒酵母中的乙醇耐受性。HpEtt1与来自酿酒酵母表示为MPE1的一种先前鉴定的蛋白具有39％序列一致性，然而，该MPE1基因不会赋予对该7E突变体的乙醇耐受性。鉴定了另一种来自树干毕赤酵母的基因，该基因此处被指定为PsETT1，它编码一种与HpETT1具有37％一致性的直系同源蛋白，并且还赋予对该7E突变体的乙醇耐受性。 1

主权项

1.一种分离的核酸，该核酸编码一种与酿酒酵母Mpe1蛋白的ORF有至少37％一致性的蛋白质，其中所述酿酒酵母Mpe1蛋白的序列为SEQ.ID NO:6，其中当所述的由该核酸编码的蛋白在该ett1突变株中表达时，所述分离的核酸互补由多形汉逊酵母的ett1突变株赋予的乙醇敏感性，并且其中由所述核酸编码的蛋白是根据SEQ.ID NO:2的多形汉逊酵母ett1蛋白或根据SEQ.ID NO:4的树干毕赤酵母ett1蛋白。

2.如权利要求1所述的分离的核酸，其中该分离的核酸被可操作地配置有一种启动子，以在由包含该分离的核酸的载体转化的酵母中表达所述蛋白。

3.如权利要求2所述的分离的核酸，其中该酵母选自由多形汉逊酵母和酿酒酵母组成的组。

4.一种酵母，该酵母被用权利要求2所述的分离的核酸转化。

5.如权利要求4所述的酵母，其中该酵母选自由多形汉逊酵母和酿酒酵母组成的组。

6.如权利要求4所述的酵母，其中该分离的核酸是以多拷贝整合入该酵母的基因组中。

7.一种制备乙醇的方法，包括：在选择以生产乙醇的条件下，在一种介质中培养权利要求4‑6中任一项所述的酵母。