[发明专利]一种西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体的分离纯化方法

摘要

本发明涉及一种同时分离高纯度西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体的方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。本发明是以西红花的干柱头为原料，通过90～95%乙醇提取、浓缩、过滤、高效制备液相色谱分离、产品回收、葡聚糖凝胶柱层析得到西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ单体。本发明通过最适宜的工艺及参数条件，使产品中西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ的含量分别达到99%以上；整个工艺过程稳定、操作简便、分离效率高，成本低廉，可大量高纯度分离制备西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体。

主权项

一种西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体的分离纯化方法，其特征在于：以鸢尾科番红花属的多年生花卉的干柱头为原料，通过提取、浓缩、过滤、高效制备液相色谱分离、葡聚糖凝胶柱层析、产品回收得到西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体，具体工艺步骤如下：1）提取将西红花粉碎成1～4mm的粗粉，按体积/质量加入40～80倍的乙醇溶液，提取3～4次，每次2～3小时，合并过滤液，待下一步处理；所述乙醇溶液的体积百分比浓度为90～95%；2）浓缩将步骤1）所得的过滤液，60℃浓缩至无醇，所得浓缩液，进行下一步处理；3）过滤将步骤2）所得的浓缩液用0.45μm滤膜过滤，所得过滤液为制备西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体的原料；4）HPLC制备色谱条件如下：色谱柱填料为：C18填料；流动相为：乙腈‑0.35wt%磷酸水溶液V/V=25：75；步骤3）所得的过滤液进样，进样量为70 mL/针，在线紫外监测，检测波长为440nm，收集目标化合物制备溶液，得西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体的HPLC制备液；5）产品回收将步骤4）所得的HPLC制备液，回收乙腈，剩余水溶液用C18富集、甲醇解析，55℃浓缩至无醇，即分别得西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体溶液；6）葡聚糖凝胶柱层析色谱条件如下：层析柱填料为：Sephadex LH‑20；流动相为：甲醇‑水溶液V/V=50：50；将步骤5）所得的西红花苷Ⅰ单体溶液、西红花苷Ⅱ的单体溶液，分别用葡聚糖凝胶柱分离，55℃浓缩至干即分别得西红花苷Ⅰ单体、西红花苷Ⅱ单体产品。