[发明专利]野生蓝莓花青素提取、纯化新方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生蓝莓果里提取、纯化花青素的方法，特别是涉及一种采用生物酶法、离子液体微波提取、超滤膜浓缩藕联高速逆流色谱纯化，最终得到高纯度蓝莓花青素的新方法。本发明优点：1、离子液体具有很强的微波吸收能力，离子液体微波提取法具有提取更快、更高效的优势，并且工艺简便易行，蓝莓花青素有效成分提取充分，花青素有效成分含量高。2、高速逆流色谱纯化技术相对于传统的固-液柱色谱技术，具有操作灵活、高效、分离速度快、制备量大、费用低等优点，并且可以工业化使用。本发明利用上述技术所得蓝莓花青素含量高、活性高，纯度最高可达42.7％。

主权项

一种采用生物酶法、离子液体微波提取、超滤膜浓缩藕联高速逆流色谱纯化，最终得到高纯度蓝莓花青素的新方法，其步骤如下：(1)生物酶解：蓝莓果加入果胶酶与纤维素酶混合酶解，在一定酶浓度、酶解温度下，酶解时间2‑3h；(2)微波回流提取：加入一定体积百分浓度的离子液体水溶液，采用微波加热回流提取法，微波功率为400‑600W，频率5000‑10000MHz，在一定料液比下较低温度提取，提取两次，每次提取时间30‑60min；(3)收集：回收离子液体，薄层层析检测分析，收集蓝莓花青素部分；(4)粗过滤：过滤，合并两次滤液，得蓝莓花青素粗提液；(5)微孔过滤：粗提液用0.8um微孔过滤。膜压力0.2MPa，过滤温度50‑60℃；(6)超滤：采用一定截留分子量的超滤膜分离，膜操作压力为0.2‑0.3MPa，截留率为90‑95％；(7)真空冷冻干燥：收集花青素溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；(8)分相：称取一定克数蓝莓花青素，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相；(9)HSCCC分离纯化：以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，分离纯化蓝莓花青素提取物；(10)检测：纯化后的蓝莓花青素用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，花色苷含量为41％以上。