[发明专利]从浒苔中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法与用途

摘要

本发明是一种从浒苔中的分离纯化制备酚酸和生物碱的方法：向浒苔干粉末加入无水甲醇制得蒸干物，再加入蒸馏水制得上清液；将上清液调pH后加入乙酸乙酯多次萃取制得组分ABCD；将组分A的甲醇溶液柱洗脱、将BCD甲醇溶液点样于硅胶GF254上，合并收集相同Rf处条带溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到9种组分，其中的3种组分再次以划线法点样于硅胶GF254上进行纯化制备，制备到8种组分。14种组分为生物碱和酚酸。可用于抑制米氏凯伦藻或者中肋骨条藻的生长。本发明方法可操作性强，制得的酚酸和生物碱纯度高，实现了从浒苔中提取制得酚酸和生物碱的突破。该方法制得的多种酚酸和生物碱具有海藻抑藻活性，具有实际应用价值。

主权项

一种从浒苔中分离纯化制备酚酸和生物碱的方法，其特征在于，其步骤如下：（1）将浒苔干粉末加入无水甲醇，常温、黑暗下浸泡，过滤后获得浸提液；减压蒸干，得蒸干物；蒸干物加入蒸馏水，充分振荡，4℃下静置过夜，离心、过滤，去除沉淀，得上清液；（2）将上清液调pH至11，加入乙酸乙酯萃取，所得上层减压蒸干，获得组分A，调节所得下层pH至7，乙酸乙酯萃取，所得上层减压蒸干，得到组分B，再调节所得下层pH至2，乙酸乙酯萃取，所得上层和下层分别减压蒸干，获得组分C和组分D；A、B、C、D 4种组分分别溶解于无水甲醇中，制得A、B、C、D 4种甲醇溶液；（3）将组分A的甲醇溶液加载于Sephadex LH‑20凝胶柱层析上，以30%、50%、70%、90%和100%甲醇溶液为洗脱溶剂；经薄层层析检测，合并收集洗脱液，减压浓缩，分别在30‑50%、70%和100%甲醇溶液洗脱下，收集到3种组分，记为组分AA、组分AB和组分AC；将组分AA，以及组分B、C、D的甲醇溶液点样于硅胶GF254上，进行薄层层析检测；以体积比为15:3:2的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，展开后，紫外254 nm下观察，组分AA出现4个斑点，Rf为 0.375、0.688、0.775和0.825；组分B的甲醇溶液出现2个斑点，Rf为 0.602和0.851；组分C的甲醇溶液出现1个斑点，Rf为 0.843；采用体积比为8:1的氯仿/甲醇为展开剂，紫外254 nm下，组分D的甲醇溶液出现2个斑点，Rf分别为 0.333和0.575；在此基础上，以划线法多次点样，合并收集相同Rf处条带，重新溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到9种组分，依次记为组分AA1、组分AA2、组分AA3、组分AA4、组分B1、组分B2、组分C1、组分D1和组分D2；其中，组分AA2、组分AA4和组分C1再次以划线法点样于硅胶GF254上进行纯化，以体积比为18:1:3的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂，制备到8种组分，依次记为组分AA21、组分AA22、组分AA23、组分AA41、组分AA42、组分AA43、组分AA44和组分C11；（4）经化合物定性检测、波长扫描和薄层层析检测，上述14种组分中，组分D1和组分D2是生物碱，其余组分为酚酸；分别减压蒸干，即得。