[发明专利]一种分子间相互作用的测量方法

摘要

本发明公开了一种测量分子间相互作用的方法，具体步骤为：（1）将待测相互作用体系中的一方分子A连接在纳米粒子表面；（2）将纳米粒子固定在微流控芯片中，记录单个纳米粒子的局域表面等离子体共振（LSPR）光谱；（3）将相互作用体系中的另一方分子B按浓度梯度分别通过纳米粒子，同时记录单个纳米粒子LSPR光谱；（4）以B分子浓度为横坐标，LSPR峰值为纵坐标做图，按照算法公式拟合该图得到A分子与B分子相互作用体系的结合常数，结合位点个数，最大LSPR峰值位移。测量结合常数范围在1.0×103M－1到1.0×1010M－1之间。

主权项

一种测量分子间相互作用的方法，以光学显微镜为成像平台，以光谱成像检测器为记录仪，以微流控芯片为样品驱动控制装置，以纳米粒子为检测对象，在单个纳米粒子水平上测量分子间相互作用体系的结合常数、结合位点个数；具体步骤如下：（1）将待测相互作用体系中的一方分子（简称A分子）连接在纳米粒子表面；（2）将纳米粒子固定在微流控芯片中，记录单个纳米粒子的LSPR光谱λAP；（3）将相互作用体系中的另一方分子（简称B分子）溶液以不同浓度依次分别通过纳米粒子，同时记录单个纳米粒子LSPR光谱λ；（4）以B分子浓度为横坐标，LSPR峰值差Dλ=λ‑λAP为纵坐标做图，按照算法公式拟合该图即可得到A分子与B分子相互作用体系的结合常数，结合位点个数，最大LSPR峰值位移；所述纳米粒子材质是金属纳米粒子、金属参杂纳米粒子、半导体纳米粒子、高分子纳米粒子；所述纳米粒子形状是球形、棒形、梭形、三角形、星形、多边形及不规则形状；所述纳米粒子尺度在10nm－1000nm之间；所述分子间相互作用体系是DNA分子与DNA分子、蛋白质分子与DNA分子、蛋白质分子与蛋白质分子、蛋白质分子与糖分子、蛋白质分子与小分子、糖分子与DNA分子、或糖分子与小分子；所述算法公式为 Δλ = Δλ max ( [ C 0 ] n α / K + [ C 0 ] n ) 其中：Δλ为有B分子通过和无B分子通过时LSPR峰值差，Δλ=λ‑λAP；Δλmax为有B分子通过和无B分子通过时LSPR峰值差的最大值；α为结合了B分子的纳米粒子上A分子位点个数与未结合B分子的纳米粒子上A分子位点个数的比值；K为A分子与B分子的结合常数；n为A分子与B分子的结合位点个数；[C0]为B分子浓度。所述拟合图为指数曲线，其线性区域内可以用来检测B分子浓度；所述结合常数范围在1.0×103M－1到1.0×1010M－1之间。