[发明专利]一种基于点击化学和G四聚体的铜离子检测试剂盒以及检测方法

摘要

本发明公开了一种基于点击化学和具有HRP活性的G四聚体检测铜离子的试剂盒以及检测方法。在反应体系中使用点击化学使修饰有叠氮基团和炔基基团的两条DNA序列形成G四聚体形成序列，之后加入高铁血红素和KCl，形成高铁血红素/G四聚体结构。由于高铁血红素/G四聚体具有HRP的活性，能催化其无色底物TMB形成有颜色的底物，实验结果通过肉眼就能判别。定量分析时，将反应终溶液转移到酶标板中，用酶标仪读取溶液在450nm的OD值。本发明可用于Cu2+的浓度的定性和定量分析，检测体系简单，特异性好，不受其他物质的干扰，操作容易，反应迅速，检测结果可靠，适合在基层实验室使用。

主权项

一种基于点击化学和G四聚体的铜离子检测试剂盒，其特征在于，包括以下成分：两段G四聚体形成序列，第一序列G1为5’‑GTGGGT AGG‑N=N=N‑3’，在其3’端修饰叠氮基团，第二序列G2为5’‑CH≡CH‑GCGGG TTGGG‑3’，其’端修饰炔基基团；所述第一序列的叠氮基团和所述第二序列的炔基基团通过Gu+催化的环加成反应而连接形成一条G四聚体形成序列；抗坏血酸钠，粉末形式；PBS反应液，含有0.2M NaCl；高铁血红素，粉末形式；1M KCl；0.05%（w/v）H2O2；0.05%（w/v）四甲基联苯胺，即TMB；以及浓H2SO4，作为终止反应液。