[发明专利]一种可视化生物芯片的检测方法有效

专利信息
申请号: 201310546683.6 申请日: 2013-11-07
公开(公告)号: CN103575894A 公开(公告)日: 2014-02-12
发明(设计)人: 李周敏;李钟卉;张立柱 申请(专利权)人: 南京祥中生物科技有限公司
主分类号: G01N33/577 分类号: G01N33/577;G01N33/68
代理公司: 南京知识律师事务所 32207 代理人: 汪旭东
地址: 210022 江苏省南京*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种可视化生物芯片的检测方法,包括以下步骤:将待测物的抗原或抗体或受体和有色偶联物或有色蛋白在PBS缓冲溶液中混合,点样于载体片基的反应区内,再用小牛血清封闭载体基片上没有结合点样物的活性基团;在生物芯片的部分反应孔内分别加入含有不同浓度梯度的检测目标物的混合标准溶液,在剩余反应孔内分别加入待测物溶液,继续向所有反应孔中依次加入检测目标物所对应的单克隆抗体和标记的羊抗鼠IgG,于水浴中反应,洗涤液洗涤;所有反应孔内继续加入显色剂,显色反应;反应后终点颜色的深浅可目视定性判断样品中待测物的含量或者使用仪器定量计算待测物溶液中检测目标物的含量。
搜索关键词: 一种 可视化 生物芯片 检测 方法
【主权项】:
一种可视化生物芯片的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1) 制作生物芯片:将待测物的抗原或抗体或受体和有色偶联物或有色蛋白在PBS缓冲溶液中混合,点样于载体片基的反应区内,再用小牛血清封闭载体基片上没有结合点样物的活性基团;(2)在上述生物芯片的部分反应孔内分别加入含有不同浓度梯度的检测目标物的混合标准溶液,在剩余反应孔内分别加入待测物溶液,继续向所有反应孔中依次加入检测目标物所对应的单克隆抗体和标记的羊抗鼠IgG,于20~37℃水浴中反应10~20min,洗涤液洗涤;(3) 所有反应孔内继续加入显色剂,显色反应2~5min后,终止反应;(4) 反应后终点颜色的深浅可以目视定性判断样品中待测物的含量或者使用仪器进行图像采集,根据检测目标物的灰度值以及标准溶液的浓度对数制作标准曲线,采用外标曲线法定量,分别计算待测物溶液中检测目标物的含量。
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