[发明专利]一种二氧化碳转化酶的固定化方法

摘要

本发明公开了一种二氧化碳转化酶的固定化方法，步骤为（1）试剂的配制：酶溶液配制；碳纳米管溶液配制；氯化钙溶液配制；壳聚糖溶液配制；海藻酸钠溶液配制；（2）酶固定化步骤：将碳纳米管溶液，酶溶液及氯化钙溶液置于离心管中，反复摇匀，获得液体I；向液体I中加入壳聚糖溶液，混合均匀，获得液体II；取海藻酸钠溶液与碳纳米管溶液混合，搅拌，获得液体III；将液体II逐滴滴入液体III中，静置，形成微胶囊；洗涤微胶囊，过滤；置于氯化钙溶液中硬化，洗涤，获得固定化的含酶微胶囊。本发明的方法具有固定化率高，固定效果好，酶活损失少，稳定性强等优点。

主权项

一种二氧化碳转化酶的固定化方法，其特征是包括以下步骤：（1）试剂的配制：①酶溶液的配制：取10uL浓度为1006‑2500U/mL二氧化碳转化酶加入到1mL0.05mol/LTris‑HCl pH=7.0缓冲液中，混匀，得到酶溶液；②碳纳米管溶液的配制：取参数为：表面积是250‑300m2/g，灰度小于3%，纯度高于97%，长度5‑15μm，直径0.1‑10nm的碳纳米管，用0.05mol/L Tris‑HCl pH=7.0缓冲液配制成5mg/mL的碳纳米管溶液；③氯化钙溶液的配制：取无水氯化钙用去离子水配制成0.02mg/mL的氯化钙溶液；④壳聚糖溶液的配制：取壳聚糖用体积浓度为1%的乙酸水溶液配制成5‑20mg/mL的壳聚糖溶液；⑤海藻酸钠溶液的配制：取海藻酸钠用去离子水配制成2‑2.5g/mL的海藻酸钠溶液；（2）酶固定化步骤：①将0.5mL碳纳米管溶液，0.005mL酶溶液及0.2mL氯化钙溶液置于2mL离心管中，反复摇匀，获得液体I；②向液体I中加入0.5mL壳聚糖溶液，用取液器反复吸入、推出，使之混合均匀，获得液体II；③取15mL海藻酸钠溶液与15mL的碳纳米管溶液混合，搅拌30min，获得液体III；④用一次性的针头直径为0.7mm的注射器将液体II逐滴滴入液体III中，静置10‑15min，形成微胶囊；⑤用0.05mol/L Tris‑HCl pH=7.0缓冲液洗涤微胶囊，过滤；⑥将步骤⑤获得的微胶囊置于氯化钙溶液中硬化15min，用0.05mol/L Tris‑HCl pH=7.0缓冲液洗涤，获得固定化的含酶微胶囊。