[发明专利]一种二氧化碳转化酶的固定化方法

权利要求书

1.一种二氧化碳转化酶的固定化方法，其特征是包括以下步骤：

（1）试剂的配制：

①酶溶液的配制：取10uL浓度为1006-2500U/mL二氧化碳转化酶加入到1mL0.05mol/LTris-HCl pH=7.0缓冲液中，混匀，得到酶溶液；

②碳纳米管溶液的配制：取参数为：表面积是250-300m²/g，灰度小于3%，纯度高于97%，长度5-15μm，直径0.1-10nm的碳纳米管，用0.05mol/L Tris-HCl pH=7.0缓冲液配制成5mg/mL的碳纳米管溶液；

③氯化钙溶液的配制：取无水氯化钙用去离子水配制成0.02mg/mL的氯化钙溶液；

④壳聚糖溶液的配制：取壳聚糖用体积浓度为1%的乙酸水溶液配制成5-20mg/mL的壳聚糖溶液；

⑤海藻酸钠溶液的配制：取海藻酸钠用去离子水配制成2-2.5g/mL的海藻酸钠溶液；

（2）酶固定化步骤：

①将0.5mL碳纳米管溶液，0.005mL酶溶液及0.2mL氯化钙溶液置于2mL离心管中，反复摇匀，获得液体I；

②向液体I中加入0.5mL壳聚糖溶液，用取液器反复吸入、推出，使之混合均匀，获得液体II；

③取15mL海藻酸钠溶液与15mL的碳纳米管溶液混合，搅拌30min，获得液体III；

④用一次性的针头直径为0.7mm的注射器将液体II逐滴滴入液体III中，静置10-15min，形成微胶囊；

⑤用0.05mol/L Tris-HCl pH=7.0缓冲液洗涤微胶囊，过滤；

⑥将步骤⑤获得的微胶囊置于氯化钙溶液中硬化15min，用0.05mol/L Tris-HCl pH=7.0缓冲液洗涤，获得固定化的含酶微胶囊。

2.根据权利要求1所述的一种二氧化碳转化酶的固定化方法，其特征是所述二氧化碳转化酶为乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶或草酰乙酸脱羧酶。