[发明专利]一种抗感染药物的检测方法

摘要

发明提供了一种抗感染药物的检测方法，包括黄芩的鉴别，还包括黄连的鉴别、黄柏的鉴别、冰片的鉴别、乙醇含量的检测、黄芩含量的测定和黄连和黄柏含量的测定，这种抗感染药物的检测方法，采用气相色谱仪对复方三黄酊的乙醇含量进行测定，同时采用薄层色谱和高效液相色谱仪进行各组份的鉴别和含量测定。测定准确，切实保证了制剂的质量，改变了药品质量无标准的现状，确保药物有效成分在合格范围，从而保证了患者用药安全、有效。

主权项

一种抗感染药物的检测方法，包括黄芩的鉴别，其特征在于，所述的抗感染药物是由如下方法制备的，原料药物的配比为，黄连 90—110重量份、 黄柏90—110重量份、黄芩90—110重量份、冰片4—6重量份；按配比分别称取各原料药物，将黄连、黄柏、黄芩研成粗粉后，按每100g粗粉加入体积百分比浓度为50%的乙醇溶液250ml‑300ml的比例，向粗粉中加入体积百分比浓度为50%的乙醇溶液，并搅拌均匀，使粗粉充分膨胀，然后将膨胀后的粗粉装入渗漉筒内，按每100g粗粉加入体积百分比浓度为50%的乙醇溶液450‑500ml的比例，缓缓加入体积百分比浓度为50%的乙醇溶液，待粗粉内的空气排出，并有18—22ml的乙醇溶液从渗漉筒上的放料阀流出后，关闭放料阀、盖上渗漉筒，浸渍46—50小时，用渗漉法缓慢渗漉，收集初漉液和续滤液，静置、滤过后成滤液，加入冰片，制成混合液，用体积百分比浓度为50%的乙醇溶液，将每100g粗粉获得的滤液加入冰片制成的混合液的体积调整至1000ml，搅拌均匀，分装，制成抗感染药物；所述的检测方法是，（1）、黄连的鉴别供试品溶液的制备：取上述方法制备的抗感染药物10ml，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液；对照药材溶液的制备：取黄连对照药材（购自中国药品生物制品检定所）0.1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品（购自中国药品生物制品检定所）5.0mg，加甲醇10ml，制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；薄层板：硅胶G薄层板（TLC Silica gel 60，50 Glass plates 10×20cm，德国默克公司生产）；展开剂：甲苯－异丙醇－乙酸乙酯－甲醇－水（6:1.5:3:1.5:0.3），置于氨蒸气饱和的展开缸中；点样量：吸取上述溶液各2µl；展开条件：温度 26 ℃、相对湿度 62％；检视：紫外灯（365nm）下；结果：供试品色谱中，在与对照品色谱和对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；（2）、黄柏的鉴别供试品溶液的制备：取上述方法制备的抗感染药物10ml，滤过，滤液挥干，残渣加体积百分比浓度为1%的醋酸甲醇溶液1ml使其溶解，作为供试品溶液；对照药材溶液的制备：取黄柏对照药材（购自中国药品生物制品检定所）0.2g，加体积百分比浓度为1%的醋酸甲醇溶液20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml作为对照药材溶液；薄层板：硅胶G薄层板（TLC Silica gel 60，50 Glass plates 10×20cm，德国默克公司生产）；展开剂：三氯甲烷－甲醇－水（30:15:4）下层溶液，置于氨蒸气饱和的展开缸中；点样量：吸取供试品溶液、对照药材溶液各2µl；展开条件：温度 26 ℃、相对湿度 62％；检视：紫外灯（365nm）下 ；结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；（3）冰片的鉴别供试品溶液的制备：取上述方法制备的抗感染药物10ml，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使其溶解，作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取冰片对照品（购自中国药品生物制品检定所）5mg，加乙酸乙酯10ml制成每1ml含0.5mg的溶液作为对照品溶液；薄层板：硅胶G薄层板（TLC Silica gel 60，50 Glass plates 10×20cm，德国默克公司生产）；展开剂：苯－乙酸乙酯（19:1）；点样量：吸取上述溶液各5µl；展开条件：温度 26 ℃、相对湿度 62％； 显色剂：将1g香草醛溶于100ml硫酸溶液中获得的香草醛硫酸溶液；检视：日光下； 结果：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；（4）乙醇含量的检测仪器与试药： Agilent6890N气相色谱仪，乙醇和正丙醇为色谱纯；色谱条件与系统适用性试验：检测器：火焰离子化检测器，色谱柱：HP－INNOWax  Polyethlene Glycol，产品号：19091N－133，内径：250.00μm，长度：30.0m，液膜厚度：0.25μm；起始温度为80℃，维持7分钟，再以每分钟10℃的速率升温至110℃；进样口温度：190℃；检测器温度：220℃，理论板数按正丙醇峰计算不低于8000，乙醇峰与正丙醇峰的分离度大于2.0，分流比：20:1；校正因子的测定：精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别置于100ml量瓶中，分别精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；取上述三种溶液1μl，注入液相色谱仪，分别连续进样3次，测定峰面积；经计算，得到校正因子； 供试品溶液的制备：精密量取恒温至20℃的供试品10ml，置于100ml量瓶中，精密加入恒温至20℃的正丙醇5ml，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；取1μl续滤液注入气相色谱仪，测定，即得乙醇含量；（5）黄芩含量的测定仪器：Agilent1200系列高效液相色谱仪；色谱柱：Inertex  C18  5u  250×4.6mm，甲醇为色谱纯，黄芩苷对照品（购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，含量以质量百分比浓度计为94.0%）；色谱条件：选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－0.2mol/L磷酸溶液（43∶57）为流动相；检测波长280nm，理论板数以黄芩苷峰计不少于3000，柱温：30℃，流速：1.0m/lmin，进样量：5μl；对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品7.30mg和6.33mg（含量以质量百分比浓度计为94.0%），分别置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（对照品溶液浓度分别为0.0686mg/ml和0.05950mg/ml）；供试品溶液的制备：精密量取上述方法制备的抗感染药物6ml，置于25ml容量瓶中，加入甲醇并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；（6）黄连和黄柏含量的测定仪器与试药：Agilent1200系列高效液相色谱仪，色谱柱：Inertex  C18  5u  250×4.6mm，乙腈为色谱纯（德国默克公司生产），盐酸小檗碱对照品（购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，含量以质量百分比浓度计为86.8%）；色谱条件：选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－0.05mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调pH值至3.0）（30∶70）为流动相；检测波长:345 nm，理论板数以盐酸小檗碱峰计不少于5000，柱温：30℃，流速：1.0m/lmin；对照品溶液的制备：精密称取盐酸小檗碱对照品13.08mg和11.41mg（含量以质量百分比浓度计为86.8%），分别置于50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置于100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，过滤，即得（对照品溶液浓度为：0.0227mg/ml和0.0198mg/ml）；供试品溶液的制备：精密量取上述方法制备的抗感染药物1.20ml，置于蒸发皿中，水浴蒸干，用甲醇分次溶解转移至50ml容量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。