[发明专利]菲油果的茎尖离体快速培养方法

摘要

本发明公开了一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，依次用洗衣粉、自来水冲洗，然后在无菌室超净台上将枝条消毒；在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段进行新芽培养，进行丛生芽诱导从而培育成无菌系；将丛生芽切成单芽，进行生根培养；第四步：将生根的试管苗移入泥炭和珍珠岩混合基质中进行炼苗，30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。采用本发明提供的培养方法繁殖菲油果，具有繁殖速度快、繁殖率高、脱病毒及提纯复壮等优点，可在短时间内工厂化生产优质种苗。

主权项

一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，具体步骤为：第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份；第二步：在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段接种于第一培养基上进行新芽培养，所述第一培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素和吲哚丁酸；待茎尖伸长至0.5cm以上时，将茎尖新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，所述第二培养基是在WP培养基的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；第三步：将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭，第三培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L；第四步：将生根的试管苗移栽至由重量比为3：1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3‑5次，15天后施肥料液；30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。