[发明专利]菲油果的茎尖离体快速培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，属于菲油果培养方法技术领域。

背景技术

菲油果是一种多用途经济树木，可作绿化、盆花，四季常绿，观赏性强花色粉红，4-5月开花，适应性强，耐零下10度低温。花谢后结椭圆形果实，重约75-100g，营养丰富，甜中带酸，且可加工成果酱、果汁等。其种苗主要靠扦插等常规方法繁殖，但周期长且生根率低，无法满足生产用种苗之需。

发明内容

本发明所要解决的是现有菲油果繁殖方法周期长、生根率低，无法满足生产需要的技术问题。

为了解决上述问题，本发明的技术方案是提供一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，具体步骤为：

第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份；

第二步：在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段接种于第一培养基上进行新芽培养，所述第一培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素(ZT)和吲哚丁酸(IBA)；待茎尖伸长至0.5cm以上时，将茎尖新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，所述第二培养基是在WP培养基(木本培养基)的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；

第三步：将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭；

第四步：将生根的试管苗移栽至由重量比为3：1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3-5次，15天后施肥料液；30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。

优选地，所述第二步中第一培养基的pH值为5.6，其中玉米素的浓度为3mg/L，吲哚丁酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为6.5g/L，蔗糖浓度为30g/L。

优选地，所述第二步中第二培养基中细胞分裂素的浓度为2mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L。

优选地，所述第三步中第三培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L。

优选地，所述第二步中生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。

优选地，所述第二步中丛生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。

优选地，所述第三步中生根培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。

优选地，所述第四步中肥料液含有以重量百分比计的0.1wt％硝酸铵、0.1wt％磷酸二氢钾、0.1wt％硫酸镁。

采用本发明提供的培养方法繁殖菲油果，具有繁殖速度快、繁殖率高、脱病毒及提纯复壮等优点，可在短时间内工厂化生产优质种苗。

具体实施方式

为使本发明更明显易懂，兹以优选实施例，作详细说明如下。

实施例

一、材料准备

1、洗衣粉溶液

2、第一培养基：在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素(ZT)和吲哚丁酸(IBA)；其中玉米素的浓度为3mg/L，吲哚丁酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为6.5g/L，蔗糖浓度为30g/L；将第一培养基的pH调节至5.6。

3、第二培养基：在WP培养基(木本培养基)的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；其中细胞分裂素的浓度为2mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L。

4、第三培养基：在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭；其中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L。

5、肥料液：其中硝酸铵的含量为0.1wt％、磷酸二氢钾的含量为0.1wt％、氯化镁的含量为0.1wt％。

二、具体步骤

第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份。