[发明专利]一种无菌松材线虫的制备方法无效
| 申请号： | 201310417640.8 | 申请日： | 2013-09-14 |
| 公开（公告）号： | CN104430184A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 姜丹宁;李杰;齐晓倩 | 申请（专利权）人： | 姜丹宁 |
| 主分类号： | A01K67/033 | 分类号： | A01K67/033 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 110179 辽宁省沈阳*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种无菌松材线虫的制备方法是涉及无菌松材线虫的制备方法的改进。本发明提供一种灵敏快速的无菌松材线虫的制备方法。本发明包括以下步骤：将葡萄孢接种于PDA培养基上，25℃恒温培养箱中培养7天，待气生菌丝基本长满培养皿时接种松材线虫，每皿接种约200头线虫；将接种后的培养皿置25℃恒温培养箱中培养10-14天，待菌丝基本被线虫消耗完后，置于4℃储存备用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 无菌 松材线虫 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种无菌松材线虫的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）将葡萄孢接种于PDA培养基上，25℃恒温培养箱中培养7天，待气生菌丝基本长满培养皿时接种松材线虫，每皿接种约200头线虫；将接种后的培养皿置25℃恒温培养箱中培养10‑14天，待菌丝基本被线虫消耗完后，置于4℃储存备用；2）松材线虫的分离采用贝尔曼漏斗分离法；其装置是将直径10‑15cm的玻璃漏斗架在铁架上，下面接一段约10cm的橡皮管，在橡皮管末端接一个1.5ml离心管，橡皮管上装一个弹簧夹；在漏斗内放一个用细铜纱制成的漏斗状网筛，将面巾纸或滤纸裁剪好后放置到漏斗状网筛上，用蒸馏水浸湿滤纸，然后将待分离的培养基材料切碎放置到滤纸上；加水淹没待分离培养基材料，静止分离24h；由于趋水性和自身的重量，线虫就离开培养基材料，沉降到漏斗底部的离心管中；关闭弹簧夹，取下离心管，将管中收集到的线虫转移至另一离心管中备用。
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