[发明专利]一种纳米磁性Fe3O4固定脂肪氧合酶及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种纳米磁性Fe3O4固定脂肪氧合酶及其制备方法和应用，采用溶胶凝胶法制备纳米磁性Fe3O4，并用Na2SiO3包裹，再用硅烷偶联剂（KH550）修饰，然后将脂肪氧合酶固定在载体上形成固定化酶。利用制得的固定化酶氧化氯丙嗪，活性好，催化效率高。

主权项

一种纳米磁性Fe3O4固定脂肪氧合酶的制备方法，其特征是，包括步骤如下：（1）纳米铁磁性粒子的制备将KNO3和KOH溶解于水中，在80‑95℃水浴中、搅拌下滴加FeSO4水溶液，滴加完毕后，再搅拌一段后停止搅拌，然后将悬浮液陈化取出冷却，洗涤干燥后即得到纳米磁性Fe3O4；（2）SiO2包裹改性纳米铁磁性粒子将无水乙醇、水和正硅酸乙酯混合充分搅拌成混合液，然后加入步骤（1）制备的纳米磁性Fe3O4，充分搅拌后加入适量浓氨水，搅拌反应，最后取固体洗涤、干燥后即得表面包裹SiO2的纳米Fe3O4；（3）硅烷偶联剂修饰改性纳米铁磁性粒子将无水乙醇、去离子水和KH550加入小烧杯中水解，再加入步骤（2）制备的表面包裹SiO2的纳米Fe3O4，氮气保护下搅拌反应，静置，最后取固体充分洗涤干燥，即得氨基化的纳米级Fe3O4复合载体；（4）磁性纳米氧化铁载体固定化脂肪氧合酶取步骤（3）中制备氨基化的纳米级Fe3O4复合载体以及一定体积的粗脂肪氧合酶液，加入烧瓶中常温搅拌吸附，然后将吸附后的酶取出洗涤、干燥、即得吸附法固定的脂肪氧合酶；或者取步骤（3）制备氨基化的纳米级Fe3O4复合载体、一定体积的粗脂肪氧合酶液和戊二醛加入到烧瓶中，常温下搅拌吸附，静置，将产品洗涤、干燥，即得交联法固定的脂肪氧合酶。