[发明专利]一种基于荧光开关的快速超分辨显微方法和装置

摘要

本发明公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微方法，在激活光对样品的荧光分子激活后，利用激光经两个渥拉斯顿棱镜形成两束垂直偏振光（s光）和两束平行偏振光（p光），这四束线偏光聚焦在样品上形成的干涉光斑对荧光样品进行漂白，再用激发光激发未被漂白的部分，也就是干涉光斑的暗斑部分并发出荧光，以实现快速超分辨显微，直接成像。本发明还公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微装置。本发明装置结构简单，数据处理方便；能够实现对标记荧光开关的样品进行快速的超分辨显微，无需对获取的图像进行高斯拟合以确定荧光分子中心位置；激活光能够激活更高密度的荧光分子。

主权项

一种基于荧光开关的快速超分辨显微方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将第一激光光束聚焦到荧光样品表面，对荧光样品进行激活；2）将第二激光光束分为偏振方向互相垂直的第一线偏光和第二线偏光，再将所述的第一线偏光分为第一平行偏振光和第一垂直偏振光，同时所述的第二线偏光分为第二平行偏振光和第二垂直偏振光，然后将四束偏振光聚焦至荧光样品表面并发生干涉形成干涉光斑，所述干涉光斑中的亮斑部分对荧光样品进行漂白；3）将第三激光光束聚焦到荧光样品表面，激发所述荧光样品中未被漂白的荧光分子发出荧光；4）利用探测器收集所述荧光的信息，并通过计算机对该信息进行数据处理，完成对样品的扫描。