[发明专利]一种L-异亮氨酸的发酵及分离纯化方法在审
| 申请号： | 201310386539.0 | 申请日： | 2013-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN103409476A | 公开（公告）日： | 2013-11-27 |
| 发明（设计）人： | 杨旭锦;石慧 | 申请（专利权）人： | 北京明新高科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C12P13/06 | 分类号： | C12P13/06;C07C229/08;C07C227/30;C12R1/13 |
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| 地址： | 100036 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种L-异亮氨酸的发酵及分离纯化工艺。本工艺以乳糖发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum)JHI3-156为出发菌种，经N+注入、紫外线复合诱变及乙硫氨酸抗性筛选获得高产乳糖发酵短杆菌JHI4-102(保藏编号：8091)，经优化培养基发酵、壳聚糖预处理和超滤等分离纯化方法后获得L-异亮氨酸。本发明所采用的方法制取的L-异亮氨酸的产酸率≥31.0g/L、纯度≥98.5％，同时能有效降低发酵成本和提取成本，适合于产业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 异亮氨酸 发酵 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种L‑异亮氨酸的发酵及分离纯化方法，主要通过以下步骤实现：1)高产菌株筛选：新鲜乳糖发酵短杆菌JHI3‑156用一定注入能量和注入剂量的氮离子(N+)注入，在0.8％Eth(乙硫氨酸)基本培养基平板上培养，通过生长圈法初筛和摇瓶发酵复筛得到菌株JHN224。新鲜的JHN224用紫外灯照射诱变，在含5mL0.6％Eth基本培养基的试管中黑暗培养后再在含0.6％Eth的基本培养基平板上培养，通过生长圈法初筛和摇瓶发酵复筛得到L‑异亮氨酸高产菌株——乳糖发酵短杆菌JHI4‑102(CGMCC No.8091)，具有良好的遗传稳定性。2)发酵罐发酵：菌种经种子逐级扩大培养，一定条件下50L～100L发酵罐发酵。3)提取纯化：发酵液经壳聚糖预处理后超滤，超滤液真空浓缩，乙醇结晶和重结晶，真空干燥，得到白色鳞片状的L‑异亮氨酸精品。
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