[发明专利]一种重组人血小板衍生生长因子BB的纯化方法无效
申请号: | 201310309907.1 | 申请日: | 2013-07-23 |
公开(公告)号: | CN104327180A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 李剑;范宝庆;徐立华;李静;张学况;张玲;薛雯;曹小丹 | 申请(专利权)人: | 天士力制药集团股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/49 | 分类号: | C07K14/49;C07K1/18;C07K1/16 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 王为 |
地址: | 300410 天津市北辰区淮河*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组人血小板衍生生长因子BB(rhPDGF-BB)的纯化方法,此法包括:将rhPDGF-BB发酵液离心,取上清液,将上清液超滤浓缩、洗滤。洗滤液经离心后,分别通过阴、阳离子交换层析柱以及凝胶层析柱进行纯化,即可得纯度较高的rhPDGF-BB溶液。该纯化方法工艺简单,可以规模化生产,产品得率和纯度高,有广阔的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 血小板 衍生 生长因子 bb 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种重组人血小板衍生生长因子BB的纯化方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)发酵液预处理:发酵液离心取上清,上清液通过膜浓缩、洗滤,然后离心取上清液;(2)阴离子交换层析:洗滤好的上清液通过阴离子交换层析色谱柱上样,接收透过液,然后通过稀释缓冲液对其稀释;(3)阳离子交换层析:通过阳离子交换层析色谱柱对稀释液进行捕获,洗脱缓冲液进行洗脱,得到洗脱液;(4)凝胶色谱层析:洗脱液经凝胶色谱柱纯化,即可得高纯度重组人血小板衍生生长因子BB;其中,所述重组人血小板衍生生长因子BB为毕赤酵母表达的胞外产物。
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