[发明专利]一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法无效
| 申请号： | 201310216310.2 | 申请日： | 2013-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN103305501A | 公开（公告）日： | 2013-09-18 |
| 发明（设计）人： | 李婧婧;周桂林;彭家成;陈先锋;程国旺;马惠应;黄书伟;张庆虎 | 申请（专利权）人： | 合肥丰乐种业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 合肥和瑞知识产权代理事务所(普通合伙) 34118 | 代理人： | 王挺 |
| 地址： | 230031 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法，该方法是取棉花幼苗的下胚轴顶端装入PCR板的孔中，加入NaOH溶液，沸水浴对样品进行细胞破碎，取出后再加Tris-Hcl溶液，然后沸水浴，取出冷却后，用ddH2O稀释10～30倍，即得棉花DNA PCR反应的模板。通过SSR分子标记的检测，其带型图与使用传统的CTAB法提取出的DNA的带型图高度一致。本方法简单快捷，避免了CTAB法和SDS法的繁琐程序，省时省力。适用于批量棉花杂交种的DNA指纹纯度检测，以及棉花育种改良等需大批量提取DNA进行检测的项目。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 pcr 棉花 dna 快速 批量 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法，其特征在于按下列步骤进行：1）取0.45‑0.55cm处于幼苗期健康棉花的下胚轴顶端，分别置于96孔型PCR板的各孔中，并在每孔中加入40μL0.25mol/L的NaOH溶液；2）将每孔中加入步骤1）下胚轴顶端和NaOH溶液的PCR板，置于水浴锅沸水中煮1‑1.5min;3）取出步骤2）水煮后的PCR板，每孔再加入60μL0.17mol/L的Tris‑Hcl溶液，再置于水浴锅沸水中煮2.5‑3.5min;4）取出步骤3）水煮后的PCR板，冷却后将每孔DNA溶液用ddH2O稀释10～30倍，即得棉花DNA PCR反应的模板。
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