[发明专利]淫羊藿发酵生产宝藿苷I的方法

摘要

本发明公开了淫羊藿发酵生产宝藿苷I的方法，它包括以下步骤：S1.酵母菌在培养基中扩繁，稀释；S2.将培养液与淫羊藿混合并搅拌均匀，置发酵罐密闭静态厌氧发酵；S3.当淫羊藿苷水解完全时，将发酵原料用提取溶剂提取；S4.浸膏用二氯甲烷洗涤，再用乙酸乙酯萃取；S5.将乙酸乙酯萃取液经氧化铝柱过滤后，经硅胶吸附柱层析，得到宝藿苷I纯品。本发明的有益效果是：采用微生物固态厌氧发酵水解含有淫羊藿苷的原料，操作简便，易于实施，高效快捷、低成本、高收率、无污染，适于工业化大规模生产。

主权项

淫羊藿发酵生产宝藿苷I的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、酵母菌在培养基中扩繁8～12小时，扩繁培养条件为pH6～7、温度15～35℃，静态发酵，然后按扩繁液体积加2～2.5倍量的水稀释得到培养液；所述的培养基用淀粉加水配成，淀粉的用量为酵母菌重量的400～800倍，淀粉中加入的水与淀粉重量比为4～6:1；S2、将步骤S1得到的培养液与粉碎至10～20目的淫羊藿混合，搅拌均匀，淫羊藿与培养液的重量比为1:0.2～1.5，然后置于发酵罐密闭静态厌氧发酵；罐内温度保持 35～45℃，发酵时间48～72小时；S3、检测，当淫羊藿苷水解完全时，将发酵原料转入提取器用提取溶剂提取，提取液浓缩，得含宝藿苷Ι的浸膏；所述的提取溶剂为酯、醇、酮或醚； S4、浸膏用二氯甲烷洗涤除去叶绿素等低极性成分和黄酮，再用乙酸乙酯萃取得到较纯的宝藿苷Ι部分；S5、将乙酸乙酯萃取液经氧化铝短柱过滤除去残存的鞣质等杂质，滤液在≤50℃温度下减压浓缩成干浸膏；按200～300目工业层析硅胶：干浸膏重量比为40：1的比例上柱，用含乙醇依次为4%、6%、8%的二氯甲烷洗脱，流出液薄层监测，将含宝藿苷Ι单一成分的流份合并，50℃以下浓缩成膏，抽松，乙醇溶解，过滤，滤液加蒸馏水，析出晶体，滤取晶体，45℃以下真空干燥至恒重，得到含量99%以上的宝藿苷Ι纯品。