[发明专利]叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金复合纳米颗粒的制备方法，包括：合成Fe3O4纳米颗粒，将纳米金颗粒包裹在修饰了靶向分子叶酸的树状大分子内部，得到{(Au0)50-G5.NH2-FA}DENPs纳米颗粒；然后在Fe3O4纳米颗粒表面形成高分子多层膜，并在最外层组装修饰{(Au0)50-G5.NH2-FA}DENPs；进行壳层交联，得到复合纳米颗Fe3O4/Au-FA；调节Fe3O4/Au-FA纳米材料的Au/Fe3O4摩尔比，优化双模态成像效果，最后进行乙酰化修饰，得到具有最好双模态成像效果的Fe3O4/Au-FA纳米材料。本发明工艺简单，反应条件温和，易于操作分离。

主权项

一种叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法，包括：（1）配制NaOH溶液，氮气保护下，提前预热到80°C，然后将Fe源溶解于盐酸中，排除空气，再加入到提前预热好的NaOH溶液中，并于氮气保护下搅拌反应2小时；反应结束后，自然冷却至室温，将沉淀洗涤分离后，得到Fe3O4纳米颗粒；（2）将叶酸和1‑（3‑二甲氨基丙基）‑3‑乙基‑碳二亚胺盐酸盐EDC分别溶于溶剂中，混合，搅拌活化2‑3h，然后滴加到第5代聚酰胺/胺树状大分子G5.NH2溶液中，搅拌反应2‑3d，透析，冷冻干燥，得到G5.NH2‑FA；其中G5.NH2的表面氨基、叶酸、EDC的摩尔比为22:1:10；（3）将HAuCl4·4H2O水溶液加入G5.NH2‑FA溶液中，搅拌10‑30min，然后加入硼氢化钠NaBH4溶液，搅拌反应1‑2h，透析，冷冻干燥，得到{(Au0)50‑G5.NH2‑FA}DENPs纳米颗粒；其中G5.NH2‑FA和HAuCl4·4H2O摩尔比为1:50；（4）通过静电层层自组装的方法，在Fe3O4纳米颗粒表面一次组装聚谷氨酸PGA、聚赖氨酸PLL和聚谷氨酸PGA三层膜，然后进一步组装{(Au0)50‑G5.NH2‑FA}DENPs，组装结束后，进行EDC交联反应，反应时间为15‑20h，离心，洗涤，得到Fe3O4/PGA/PLL/PGA/{(Au0)50‑G5.NH2‑FA}DENPs；其中每次组装吸附时间为15‑20min，Fe3O4纳米颗粒溶液、PGA溶液、PLL溶液、PGA溶液的体积比为0.5:1:1：1；（5）将HAuCl4·4H2O溶液加入上述合成的Fe3O4/PGA/PLL/PGA/{(Au0)50‑G5.NH2‑FA}DENPs溶液中，超声反应5‑8min，再加入水合肼N2H4·H2O超声反应5‑8min，重复6‑7次，离心，洗涤，得到Fe3O4/Au‑FA纳米材料，将Fe3O4/Au‑FA纳米材料分散在水中，然后加入三乙胺，振荡混合，再滴加入乙酸酐，振荡反应18‑20h，离心，洗涤，再分散在水中，即得表面乙酰化的Fe3O4/Au‑FA纳米颗粒，其中HAuCl4·4H2O溶液、Fe3O4/PGA/PLL/PGA/{(Au0)50‑G5.NH2‑FA}DENPs溶液、水合肼N2H4·H2O溶液的体积比为40μL：2mL：40μL；三乙胺、乙酸酐与树状大分子中的表面NH2摩尔比为11:5:1。