[发明专利]一种荧光原位杂交hTERT转染室间质评细胞系及其制备方法

摘要

本发明涉及医学遗传学诊断质量控制的荧光原位杂交hTERT转染室间质评细胞系及制备方法，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，以脂质体转染入因临床诊治需要而确诊为常见染色体数目异常的剩余的贴壁对数生长活细胞，G418筛选整合有重组子的细胞系，传代扩增、冻存，再取这些细胞系，按质控所需比例混合，使原先每例细胞系只有1种染色体数目异常转变为含有一定比例的常见染色体数目异常的嵌合体质控细胞，增加了鉴别诊断、嵌合体诊断的难度，原始细胞易得且将废弃的多余细胞转化为有效的永生化质控细胞，以疑难质控细胞作室间质评，对及时发现和解决质量问题、提高诊断水平具有重要意义。

主权项

一种用于医学遗传学诊断质量控制的荧光原位杂交hTERT转染室间质评细胞系及制备方法，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo‑hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo‑hTERT重组子，以脂质体转染入因临床诊治需要而确诊为常见染色体数目异常的剩余的贴壁对数生长活细胞，G418筛选整合有重组子的细胞系，传代扩增、冻存，再取这些细胞系，按质控所需比例混合，制成疑难的常见染色体数目异常诊断质控细胞系，所用原始细胞易得，且将废弃的多余细胞转化为可永久生存、无限扩增的永生化质控细胞，可按需复制足够的细胞系以满足质控要求，多例染色体数目异常按质控所需比例混合后使原先每例细胞系仅有单一染色体数目异常转变为含有一定比例的多种染色体数目异常的嵌合体质控细胞系，增加了鉴别诊断、嵌合体诊断的难度，用以室内质控、室间质评及技术水平考核，具有更有效的质量控制效果。