[发明专利]一种杀菌肽CAD的重组表达及其制备方法有效
| 申请号： | 201310067480.9 | 申请日： | 2013-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN103255159A | 公开（公告）日： | 2013-08-21 |
| 发明（设计）人： | 姬生跃;李伟丽;武刚 | 申请（专利权）人： | 张掖市奥林贝尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/62;C12P21/06;C07K19/00;C07K1/22 |
| 代理公司： | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人： | 张英荷 |
| 地址： | 734000 甘肃省*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种杀菌肽CAD的重组表达及制备方法，属于生物技术领域。本发明是将天蚕素杀菌肽CAD的基因与分子伴侣β-半乳糖苷酶Abg蛋白标签融合，合成编码Abg-杀菌肽CAD融合蛋白的融合基因；再用限制性内切酶对杀菌肽CAD融合基因进行双酶切，并与同样用限制性内切酶双酶切的表达载体pUC18质粒连接，构建一种表达毒性蛋白的表达载体转化至大肠杆菌E.coliER2566，获得基因工程菌；然后通过培养基因工程菌组成型表达获得融合蛋白Abg-CAD；最后通过FactorXa蛋白酶酶切，纯化，获得杀菌肽CAD，其中可溶性目的蛋白占菌体总目的蛋白的90%以上，蛋白纯度达95%以上，为取代抗生素应用于医药、兽药、水产、饲料添加剂等产业奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杀菌 cad 重组 表达 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种杀菌肽CAD的重组表达，是以pUC18为表达载体，以大肠杆菌E.coli ER 2566为宿主，以天蚕素杀菌肽CAD的基因与分子伴侣β‑半乳糖苷酶Abg蛋白标签融合，合成编码Abg‑CAD的融合基因重组表达。
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