[发明专利]胎儿有核红细胞分离纯化方法及唐氏综合症筛查试剂盒无效

专利信息
申请号: 201310045455.0 申请日: 2013-02-05
公开(公告)号: CN103103161A 公开(公告)日: 2013-05-15
发明(设计)人: 夏庆杰;杨林;吴苹 申请(专利权)人: 山东亚大药业有限公司
主分类号: C12N5/078 分类号: C12N5/078;C12Q1/68
代理公司: 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 代理人: 韩百翠
地址: 252000 *** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开了一种胎儿有核红细胞分离纯化方法及唐氏综合症筛查试剂盒,属于分子细胞生物学检测领域。它首先将孕妇外周血与CD45抗体标记磁珠充分混合以吸附白细胞,于磁分离器上弃之并将上层细胞转至含CD71抗体标记磁珠的试管中,充分混匀,于磁分离器上分离收获有核红细胞;再提取其基因组DNA;将SRY、DSCR和USC2特异探针以及DSCR和USC2竞争性引物及SRY特异性引物和待测DNA加入同一个竞争性荧光定量PCR反应体系,进行竞争性多重实时荧光定量PCR反应,获得DSCR和USC2的Ct,计算其差值进而判断待测样本是否DS高危。
搜索关键词: 胎儿 红细胞 分离 纯化 方法 综合症 试剂盒
【主权项】:
一种胎儿有核红细胞的分离纯化方法,其特征是,取孕期在10-18周的孕妇外周静脉血2-5ml,加入到含有10E+8个抗CD45抗体磁珠与肝素的抗凝采血管中负筛选,充分混匀以吸附白细胞,然后于磁分离器上分离后取上层血液转移到含有10E+7个抗CD71抗体磁珠与肝素的抗凝采血管中正筛选,磷酸缓冲盐溶液充分洗涤,然后于磁分离器上分离,去净磷酸缓冲盐溶液后加入超纯水,98℃下裂解细胞释放DNA,置-20℃冰箱保存备用。
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