[发明专利]胎儿有核红细胞分离纯化方法及唐氏综合症筛查试剂盒

权利要求书

1.一种胎儿有核红细胞的分离纯化方法，其特征是，取孕期在10－18周的孕妇外周静脉血2－5ml，加入到含有10E+8个抗CD45抗体磁珠与肝素的抗凝采血管中负筛选，充分混匀以吸附白细胞，然后于磁分离器上分离后取上层血液转移到含有10E+7个抗CD71抗体磁珠与肝素的抗凝采血管中正筛选，磷酸缓冲盐溶液充分洗涤，然后于磁分离器上分离，去净磷酸缓冲盐溶液后加入超纯水，98℃下裂解细胞释放DNA，置－20℃冰箱保存备用。

2.一种使用权利要求1分离纯化的有核红细胞进行唐氏综合症筛查的试剂盒，其特征是，包括DNA提取试剂、含有10E+8个抗CD45抗体磁珠与肝素的抗凝采血管、含10E+7个CD71抗体磁珠与肝素的抗凝采血管、DSCR和USC2特异的共用引物、双色荧光Taqman探针以及SRY基因特异的引物和探针；

所述DSCR和USC2特异的共用引物为：上游引物:5’-AAA GTT TCT TCT GGA TCT ACA G-3’；下游引物:5’-TCC TCT GTG CTC TGA GCT AAG-3’；DSCR特异TaqMan探针DSCRTM:5’-[FAM]ACA TTT TGG ATG CAC TGG GA[TAMRA]-3’；USC2特异TaqMan探针5’-[HEX]CAAAAC TCA CAG AGG GAC TC[TAMRA]-3’；

所述SRY基因特异的引物和探针：SRY上游引物:5’-CCA GTG GAA AAT GCT TAC TG-3’；SRY下游引物:5’-CTC TGT GCA TGG CCT GTA AT-3’；SRY特异的探针：5’-ROX-CCATTCTTCCAGGAGGCAC-TAMRA-3’。

3.如权利要求2所述的唐氏综合症筛查试剂盒，还含有1X PCR缓冲液，Taq DNA聚合酶，Mg++、dNTPs及磷酸缓冲盐溶液。