[发明专利]蛋白偶联的试剂化合物的整体分子量测定有效
| 申请号： | 201280047453.9 | 申请日： | 2012-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN103858003B | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | J·F·瓦利耶尔-道格拉斯;O·萨拉斯 | 申请（专利权）人： | 西雅图基因公司 |
| 主分类号： | G01N24/00 | 分类号： | G01N24/00 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 马莉华;崔佳佳 |
| 地址： | 美国华*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了用于快速测定药物偶联物连接于链间半胱氨酸残基所致的非共价结合抗体重链(HC)和抗体轻链(LC)的完整分子量的方法和系统。通过使用天然脱盐条件分析抗体‑药物偶联物(ADC)，ADC的完整‑二价结构得以维持，该二价结构通常会因LCMS常用的变性色谱条件而降解。随后使用去溶剂化和离子化的ESI‑MS条件测定脱盐ADC的分子量。本文中描述的方法用于直接测量在链间半胱氨酸残基上偶联的ADC的完整分子量。本文描述的方法也用于个体ADC种类的相对定量测得。 | ||
| 搜索关键词： | 半胱氨酸残基 药物偶联物 二价结构 脱盐 非共价结合 分子量测定 试剂化合物 蛋白偶联 抗体轻链 抗体重链 快速测定 色谱条件 条件分析 相对定量 直接测量 离子化 溶剂化 变性 降解 抗体 偶联 | ||
【主权项】：
1.一种定量测定混合物中抗体药剂偶联化合物的分布的方法，包括：(a)将基质中的混合物提供给在非变性条件下与流动相运行的分离介质以从混合物中除去基质并产生洗脱液；(b)将所述洗脱液引入质谱仪；(c)从去卷积质谱直接确立所述抗体药剂偶联化合物的每个种类的分子量和离子强度，和(d)通过离子强度定量测定所述抗体药剂偶联化合物的分布；其中：所述抗体药剂偶联化合物的每个种类具有一至八个偶联于还原的链间二硫键的药剂部分，所述抗体药剂偶联化合物是非共价结合的且未变性的，并且保持其完整二价的抗体结构，并且所述流动相包含挥发性盐中且不含非挥发性盐，并与质谱仪兼容。
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