[发明专利]重金属离子完全抗原的制备方法

摘要

一种重金属离子完全抗原的制备方法，包括如下步骤在室温条件下，按照重金属离子与异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸的摩尔比为11，将0.1mol/L的重金属离子硝酸盐溶液与所述异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸于pH为7.2~7.4的条件下混合，搅拌进行螯合反应，得到重金属‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸半抗原；及在室温条件下，按照质量比为11，将所述重金属‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸半抗原与多聚赖氨酸于pH为9.0的条件下混合，搅拌进行偶联反应，得到重金属‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸‑多聚赖氨酸完全抗原溶液。上述重金属离子完全抗原的制备方法制备的重金属离子完全抗原制备的抗重金属离子抗体具有较高的效价。

主权项

一种重金属离子完全抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)重金属镉离子硝酸盐溶液的配置：将Cd(NO3)2·4H2O和蒸馏水混合配制成镉离子的浓度为0.1mol/L的硝酸镉溶液；(2)在室温条件下，按照重金属镉离子与异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸的摩尔比为1:1，将0.1mol/L的硝酸镉溶液与异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸于pH为7.4的条件下混合，使用转速为100转/分钟的摇床搅拌24小时，进行螯合反应，得到重金属镉‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸半抗原；(3)在室温条件下，按照质量比为1:1，将重金属镉‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸半抗原与多聚赖氨酸于pH为9.0的条件下混合，使用转速为100转/分钟的摇床搅拌22小时，进行偶联反应，得到重金属镉‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸‑多聚赖氨酸完全抗原溶液；用四乙酸二氨基乙烯对美国Milipore公司的30超滤离心管清洗，并用pH为7.4的4‑羟乙基哌嗪乙磺酸调节超滤离心管的pH，采用美国Milipore公司的30超滤离心管对重金属镉‑异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸‑多聚赖氨酸完全抗原溶液进行分离纯化；将分离纯化后的产物于‑80℃冷冻之后，进行真空干燥，并置于冰箱中‑20℃冷藏备用；其中，pH为7.4的4‑羟乙基哌嗪乙磺酸的配制为：取23.8克的4‑羟乙基哌嗪乙磺酸溶于90毫升的双蒸水中，用1mol/L的NaOH调pH至7.4，然后用水定容至100mL，过滤除菌，分装小瓶，4℃或‑20℃保存。