[发明专利]高密度培养裂壶藻的方法

摘要

本发明公开了一种高密度培养裂壶藻的方法，包括菌种活化，制备豆粕水解物，种子培养，摇瓶培养，10L发酵罐培养，500L发酵罐培养。方法简单易操作，成本低，生物量高。

主权项

一种高密度培养裂壶藻的方法，其特征在于：包括以下步骤：一、菌种活化，将保藏于‑70℃的菌种转接于斜面培养基，25℃培养3—4天；二、制备豆粕水解物，取 32g 豆饼粉加入65ml1M的HCl，定容至250ml，120℃高压水解25分钟，加入50 ml1M的NaOH 溶液，6000rpm离心8分钟，上清液用1M的NaOH溶液调pH至7.0，6000rpm离心8分钟除去沉淀定容至800ml，得到的溶液即为 40g/L的豆粕水解液；三、种子培养，一级种子：将活化的斜面菌种接入装有100mL种子培养基的 500mL三角瓶，25℃、200rpm培养2天；二级种子：取4ml一级种子，接入装有 100mL种子培养基的 500mL三角瓶，25℃、200rpm培养2天；四、摇瓶培养，取4mL二级种子液接入装有100mL发酵培养基的 500mL三角瓶，25℃、 200rpm培养5天；五、10L发酵罐培养，将培养好的液体种子，按4%接种量接种于发酵培养基中，在25℃和4L/min的通气量下培养3天，通过流加2mol/LHCI或2mol/LNaOH自动控制发酵液pH；六、500L发酵罐培养，将培养好的液体种子，按10%接种量接种于发酵培养基中，在25℃和通气比3.48 L min^‑1L^‑1的通气量下培养4天，通过流加2mol/LHCI或 2mol/LNaOH自动控制发酵液pH。