[发明专利]一种分离纯化肝素钠的方法

摘要

本发明涉及一种分离纯化肝素钠的方法。猪肠粘膜经提取制得的肝素钠中含有大量蛋白质和核酸等杂质，给肝素钠的精制纯化带来一定的难题。传统的工艺方法通过盐解工艺或酶解工艺去除残留的杂质，对肝素钠提取质量要求高，去除效率比较低，后续氧化沉淀精制时间长，氧化剂(过氧化氢)使用量大，收率低。本发明方法采用酶解和沉淀剂去除肝素钠中残留的杂质，工艺设计合理，去除效率高，缩短了后续精制工时，提高了产品收率，降低了成本。

主权项

一种分离纯化肝素钠的方法，其特征是：(1)、将肝素钠加入到反应罐中用水完全溶解，肝素钠与水的重量比为1∶6至1∶8；(2)、调pH＝6.0‑7.0，升温至50‑55℃，按5‑10g/亿单位加入胃蛋白酶，按10‑20g/亿单位加入胰蛋白酶，酶解保温2‑4小时；(3)、调pH＝8.0‑9.0，升温至80‑90℃，静置20至40分钟，然后降温至50‑55℃，按20％至30％(v/v)比例加入乙醇，调节pH＝11.0‑12.0，静置直至分层；(4)、虹吸酶解上清液，下层沉淀物离心后母液合并至上清液中，弃去固体分离物。(5)、调pH＝6.0‑7.0，升温至60‑70℃，按0.3％‑0.5％(w/v)比例加入絮凝沉淀剂1，搅拌均匀后，静置直至分层，虹吸上清，沉淀物离心后母液合并至上清液中，弃去固体分离物。(6)、升温至40‑50℃，调pH＝11.0‑12.0，按0.3％‑0.5％(w/v)比例加入絮凝沉淀剂2，静置直至分层，虹吸上清，沉淀物离心后母液合并至上清液中，弃去固体分离物。(7)、将步骤(6)中的上清液用乙醇沉淀，之后用过氧化氢氧化脱色，脱水后烘干，即得分离纯化的肝素钠。