[发明专利]一种分离纯化肝素钠的方法有效
申请号: | 201210555008.5 | 申请日: | 2012-12-07 |
公开(公告)号: | CN103030715A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 夏衬来;迟培升;刁爱芹 | 申请(专利权)人: | 青岛九龙生物医药有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分离 纯化 肝素钠 方法 | ||
1.一种分离纯化肝素钠的方法,其特征是:
(1)、将肝素钠加入到反应罐中用水完全溶解,肝素钠与水的重量比为1∶6至1∶8;
(2)、调pH=6.0-7.0,升温至50-55℃,按5-10g/亿单位加入胃蛋白酶,按10-20g/亿单位加入胰蛋白酶,酶解保温2-4小时;
(3)、调pH=8.0-9.0,升温至80-90℃,静置20至40分钟,然后降温至50-55℃,按20%至30%(v/v)比例加入乙醇,调节pH=11.0-12.0,静置直至分层;
(4)、虹吸酶解上清液,下层沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。
(5)、调pH=6.0-7.0,升温至60-70℃,按0.3%-0.5%(w/v)比例加入絮凝沉淀剂1,搅拌均匀后,静置直至分层,虹吸上清,沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。
(6)、升温至40-50℃,调pH=11.0-12.0,按0.3%-0.5%(w/v)比例加入絮凝沉淀剂2,静置直至分层,虹吸上清,沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。
(7)、将步骤(6)中的上清液用乙醇沉淀,之后用过氧化氢氧化脱色,脱水后烘干,即得分离纯化的肝素钠。
2.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:酶解保温pH=6.0-7.0,保温温度为50-55℃。
3.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:酶解结束后按20%至30%(v/v)比例加入乙醇。
4.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:絮凝沉淀剂1选自碳酸钙、氢氧化铝及壳聚糖或其混合物。
5.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:絮凝沉淀剂2选自羟基磷灰石(HAP)和十二烷基磺酸钠(SDBS)或其混合物。
6.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:步骤(4)和步骤(5)中沉淀物离心母液可直接合并至上清。
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