[发明专利]一种分离纯化肝素钠的方法有效

专利信息
申请号: 201210555008.5 申请日: 2012-12-07
公开(公告)号: CN103030715A 公开(公告)日: 2013-04-10
发明(设计)人: 夏衬来;迟培升;刁爱芹 申请(专利权)人: 青岛九龙生物医药有限公司
主分类号: C08B37/10 分类号: C08B37/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 266100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 分离 纯化 肝素钠 方法
【权利要求书】:

1.一种分离纯化肝素钠的方法,其特征是:

(1)、将肝素钠加入到反应罐中用水完全溶解,肝素钠与水的重量比为1∶6至1∶8;

(2)、调pH=6.0-7.0,升温至50-55℃,按5-10g/亿单位加入胃蛋白酶,按10-20g/亿单位加入胰蛋白酶,酶解保温2-4小时;

(3)、调pH=8.0-9.0,升温至80-90℃,静置20至40分钟,然后降温至50-55℃,按20%至30%(v/v)比例加入乙醇,调节pH=11.0-12.0,静置直至分层;

(4)、虹吸酶解上清液,下层沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。

(5)、调pH=6.0-7.0,升温至60-70℃,按0.3%-0.5%(w/v)比例加入絮凝沉淀剂1,搅拌均匀后,静置直至分层,虹吸上清,沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。

(6)、升温至40-50℃,调pH=11.0-12.0,按0.3%-0.5%(w/v)比例加入絮凝沉淀剂2,静置直至分层,虹吸上清,沉淀物离心后母液合并至上清液中,弃去固体分离物。

(7)、将步骤(6)中的上清液用乙醇沉淀,之后用过氧化氢氧化脱色,脱水后烘干,即得分离纯化的肝素钠。

2.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:酶解保温pH=6.0-7.0,保温温度为50-55℃。

3.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:酶解结束后按20%至30%(v/v)比例加入乙醇。

4.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:絮凝沉淀剂1选自碳酸钙、氢氧化铝及壳聚糖或其混合物。

5.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:絮凝沉淀剂2选自羟基磷灰石(HAP)和十二烷基磺酸钠(SDBS)或其混合物。

6.按照权利要求书1所述的方法,其特征为:步骤(4)和步骤(5)中沉淀物离心母液可直接合并至上清。

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