[发明专利]质粒DNA定量检测用标准品的制备方法有效
申请号: | 201210541174.X | 申请日: | 2012-12-13 |
公开(公告)号: | CN103063783A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 董莲华;孟盈;王晶;傅博强;高运华;张玲 | 申请(专利权)人: | 中国计量科学研究院 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/02 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 张涛 |
地址: | 100013 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明首次建立了一种质粒DNA定量检测用标准品的制备方法,将质粒DNA经超声波处理成为长度为200bp以下的片段后,进行酶解,然后以核苷酸标准品和同位素标记的核苷酸作为内标,用高效液相色谱-质谱分离单核苷酸并准确定量。本发明提供了超声波处理质粒DNA的优选条件和高效液相色谱法分离四种核苷酸的条件。本方法精密度好,准确度高:采用核苷酸标准品,不依赖于DNA标准品,因此测量结果可溯源至核苷酸有证标准物质,从而保证测量结果的可靠和可溯源。由于用本方法可对质粒DNA进行绝对定量,可用于质粒DNA定量检测用标准品的制备。 | ||
搜索关键词: | 质粒 dna 定量 检测 标准 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种质粒DNA定量检测用标准品的制备方法,将质粒DNA进行前处理,然后以核苷酸标准品和同位素标记的核苷酸作为内标,用高效液相色谱‑质谱法分离单核苷酸并准确定量;其特征为,所述前处理是将质粒DNA经超声波处理成为长度为200bp以下的片段,然后进行酶解。
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