[发明专利]一种载蛋白的磁性微球的制备方法

摘要

一种载蛋白的磁性微球的制备方法：（1）将三价铁离子盐及乙酸钠加入到乙二醇溶液中反应；磁性分离；（2）将Fe3O4颗粒于盐酸中溶解，磁性分离后分散于乙醇、蒸馏水、浓氨水的混合溶液中；加入原硅酸四乙酯搅拌，磁性分离；（3）将Fe3O4@SiO2磁性微球于盐酸中溶解，磁性分离，加入到甲苯溶液中，搅拌分散，在氮气氛围下加入环氧化试剂和三乙胺，加热回流；冷却，磁性分离；（4）将环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球加入蛋白溶液，37℃摇床恒温偶联；加入封闭试剂对未反应的氨基于37℃中和，得到载蛋白的磁性微球。本发明原料简单易得，易于放大，产品性能优越，可调控性强，适用于分离纯化免疫球蛋白及免疫沉淀等领域。

主权项

一种载蛋白的磁性微球的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）制备Fe3O4颗粒：将可溶性的三价铁离子盐及乙酸钠加入到乙二醇溶液中并搅拌均匀；然后将该混合溶液放入密闭容器中，在180~300℃条件下反应4~72h；冷却后通过磁性分离，将所得产物洗涤后干燥，制得Fe3O4颗粒；（2）Fe3O4@SiO2核壳结构的制备：将步骤（1）制得的Fe3O4颗粒于盐酸溶液中溶解，然后磁性分离，将分离得到的颗粒洗涤；将洗涤后的颗粒分散于乙醇、蒸馏水、浓氨水的混合溶液中；向混合溶液中逐滴加入原硅酸四乙酯，室温搅拌6~24h后对产物进行磁性分离，并将其洗涤后干燥，得到Fe3O4@SiO2核壳结构，即Fe3O4@SiO2 磁性微球；（3）Fe3O4@SiO2 磁性微球的环氧化：将步骤（2）制得的Fe3O4@SiO2磁性微球于盐酸溶液中溶解，然后磁性分离，将分离得到的颗粒洗涤至中性并烘干；将烘干后的颗粒加入到经金属钠干燥脱水的甲苯溶液中，搅拌分散，然后在氮气氛围下加入环氧化试剂和经KOH干燥脱水的三乙胺，加热回流4~6h；冷却至室温，通过磁性分离，将所得产物用甲苯和丙酮洗涤后干燥，得到环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球；（4）载蛋白的磁性微球的制备：将步骤（3）制得的环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球用PBS溶液清洗，加入pH为7~9的蛋白溶液，于37℃摇床恒温偶联2~48h后再用PBS溶液清洗；然后加入封闭试剂对未反应的氨基于37℃中和2~12h后用PBS溶液清洗，得到载蛋白的磁性微球。