[发明专利]一种昆虫中肠细胞的分离及离体培养方法无效

专利信息
申请号: 201210475498.8 申请日: 2012-11-19
公开(公告)号: CN102911908A 公开(公告)日: 2013-02-06
发明(设计)人: 李长友;郑桂玲;周洪旭;吴艳蕾;童丹丹 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: C12N5/07 分类号: C12N5/07
代理公司: 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 代理人: 曾庆国
地址: 266109 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提供一种昆虫中肠细胞的分离及离体培养方法,是将分离的中肠组织用Dispase Ⅱ酶进行酶解。获得的中肠细胞用添加有条件培养基和胎牛血清的TNM-FH培养基进行离体培养。本发明提供了一种简单有效适合昆虫中肠细胞离体培养、中肠生理学以及病理学研究的昆虫中肠细胞分离方法,包括解离中肠细胞所用的酶液,维持细胞离体状态的适合培养基以及血清浓度和添加物,使刚分离下的中肠细胞存活率达80%以上,离体培养60d后的细胞存活率在20%以上,离体条件下中肠细胞可以被核型多角体病毒侵染,并具有碱性磷酸酶等的分泌能力,为从事昆虫中肠生理功能的研究奠定基础。
搜索关键词: 一种 昆虫 细胞 分离 培养 方法
【主权项】:
一种家蚕幼虫中肠细胞的分离方法,其特征在于,所述的分离方法是将分离的中肠组织用Dispase Ⅱ酶进行酶解,酶解结束后,吹打酶解后的中肠组织,并将酶解液进行过滤以除去中肠底膜组织,将收集的细胞滤液离心弃去上清,即获得分离的家蚕幼虫的中肠细胞。
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