[发明专利]柑橘生物类黄酮中橙皮甙含量的测定方法

摘要

柑橘生物类黄酮中橙皮甙含量的测定方法，包括以下步骤：（1）稀释溶液的制备；（2）对照品溶液的制备；（3）供试品溶液的制备；（4）确定色谱条件；（5）检验程序。本发明操作简便、专属性和重复性好、回收率高，能够准确测定橙皮甙的含量，从而有效控制柑橘生物类黄酮混合物的质量。

主权项

柑橘生物类黄酮中橙皮甙含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）、稀释溶液的制备： 取20mmol/l的氢氧化钠溶液和50%甲醇溶液按（0.5～1.5：1.5～0.5）比例混合均匀；（2）、对照品溶液的制备：精密称取橙皮甙和柚皮甙对照品适量，加稀释溶液制成橙皮甙和柚皮甙浓度均为0.10mg/ml的对照品溶液；（3）、供试品溶液的制备：精密称取10‑15mg样品于100ml容量瓶中，加入80ml稀释溶液，60～70℃超声10‑20min，取出，冷却至室温后，用稀释溶液定容至刻度，取部分溶液用0.45μm微孔滤膜过滤后备用；（4）、确定色谱条件：色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；流动相和梯度：流动相用0.45μm微孔滤膜过滤后，脱气；流动相A：0.1%三氟乙酸水溶液；流动相B：0.1%三氟乙酸的甲醇‑乙腈1:1溶液；梯度洗脱时间见图1；柱温：35℃ ；流速：1ml/min ； 检测波长：292nm；保留时间：柚皮苷约 17.6min ； 橙皮甙约 18.0min；（5）、检验程序：    分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，在规定条件下，每针运行时间应三倍于橙皮甙的保留时间；系统适应性条件：完全分离两种系统适应性物质，柱效应达到：理论塔板数大于2000，橙皮甙和柚皮甙的分离度大于1.5；通过测得数据计算橙皮甙含量  橙皮甙%=A样×C对×100/A对×W样×100%  式中：C对：橙皮甙标准工作溶液浓度mg/ml；A样：样品峰面积；A对：橙皮甙标准工作溶液峰面积平均值；W样：样品的质量mg。