[发明专利]一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶的方法

摘要

本发明公开了一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶(SOD)的方法，包括以下步骤：将收集到的洁净罗非鱼血红细胞用双蒸水稀释后，经超声波辅助细胞破膜处理；依次加入无水乙醇和氯仿沉淀杂蛋白，离心，收集上清液，并用氮吹仪去除有机溶剂；将收集到的上清液在60℃条件下加热处理，离心，收集上清液；采用多功能蛋白快速纯化液相色谱系统控制，将经上述步骤得到的SOD液用阴离子交换进行纯化，得到的高纯度SOD液。本发明提纯方法耗时短，操作单元精简，适合于工业化生产；能较好地解决罗非鱼血排放造成的环境污染问题，并能够显著地增加企业的附加值。

主权项

一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶的方法，其特征在于包括以下步骤：a.红细胞破碎：将收集到的洁净罗非鱼血红细胞用1~2倍体积的双蒸水稀释后，在超声功率300~400W条件下作用15~20min进行红细胞破碎处理，然后5000×g离心15min，收集上层红细胞液；b.乙醇、氯仿沉淀：先后加入无水乙醇和氯仿到红细胞液中，边加边搅拌，搅拌20min后，静置30min，然后10000×g离心15min，收集上清液；再用氮吹仪处理去除乙醇和氯仿；c.热变性处理：将步骤b所得上清液在60℃条件下恒温水浴15~20min，冷却后10000×g离心15min，收集上清液；d.阴离子交换：将步骤c所得上清液在多功能蛋白快速纯化液相色谱系统辅助下，采用阴离子交换法，制得SOD液。