[发明专利]用于基因定点修饰的TALE重复片段的高效合成方法有效
| 申请号: | 201210380206.2 | 申请日: | 2012-09-29 |
| 公开(公告)号: | CN102864158A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
| 发明(设计)人: | 魏文胜;杨君娇;袁鹏飞 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
| 主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12N15/63;C12N15/85;C12N15/10;C12R1/64 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
| 地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种TALE重复片段的合成方法。本发明通过对用于PCR扩增的DNA模板以及引物的设计,使用尿嘧啶脱氧核糖核苷酸切除法用尿嘧啶切除试剂(uracil-specific excision reagent:USER)制造DNA片段两端的粘性末端,将含单个、二个或三个TALE重复单位的多个DNA片段按正确顺序连接进载体,获得能表达特异性结合靶基因的TALE蛋白的重组载体,并利用重组载体在细胞中完成靶基因敲除、敲入或过表达、抑制表达。本发明方法省时、简便、正确率高,能够实现高通量、自动化需求。 | ||
| 搜索关键词: | 用于 基因 定点 修饰 tale 重复 片段 高效 合成 方法 | ||
【主权项】:
用于合成TALE重复序列的连接单体,所述连接单体为编码TALE重复序列的DNA片段,所述DNA片段两端具有尿嘧啶酶切位点。
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