[发明专利]从血液中分离免疫细胞的方法及其在治疗疾病中的应用有效

专利信息
申请号: 201210379431.4 申请日: 2012-10-09
公开(公告)号: CN102876631A 公开(公告)日: 2013-01-16
发明(设计)人: 姚静;杨传庆;张辉;郑爱玲;张星星;朱晓青 申请(专利权)人: 博雅干细胞科技有限公司
主分类号: C12N5/078 分类号: C12N5/078;C12N5/0784;C12N5/0783;A01N1/02;A61K35/14;A61P35/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 214092 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及一种简单有效的血液免疫细胞的提取方法,以及相配套使用的冻存和复苏的方法,以及复苏后免疫细胞扩增的方法,其包括如下步骤:全血样本预处理、Ficoll法分离、MNC收集和洗涤、MNC计数、MNC冻存、细胞复苏、MNC计数和细胞扩增。本发明发现使用特定操作步骤的提取、冻存、复苏以及扩增,可以有效地获得免疫细胞,该免疫细胞可用于治疗肿瘤。
搜索关键词: 血液 分离 免疫 细胞 方法 及其 治疗 疾病 中的 应用
【主权项】:
从血液中提取免疫细胞的方法,该方法包括以下分离步骤:(1)全血样本预处理:将血样本充分混匀,转移至离心容器中,稀释血液;(2)Ficoll法分离:取离心容器,加入Ficoll细胞分离液,然后将稀释后的血液样本加入Ficoll细胞分离液的上层,将离心容器置于离心装置中,离心处理;(3)单个核细胞收集和洗涤:离心处理结束后,将上层血浆转移至离心容器,吸取白膜层于离心容器内,补充生理盐水,混匀后再次离心处理,待细胞沉淀后洗涤两次;以及任选的下列步骤:(4)针对步骤(3)所得免疫细胞,检测以下项目的至少一项:单个核细胞总数、单个核细胞活率、细胞污染、遗传病、HLA‑ABC/DR配型。
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