[发明专利]人血白蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及一种人血白蛋白的制备方法，该方法是从人血浆分离的废弃物组分IV沉淀中提取、纯化出人血白蛋白，从而可以提高血浆的综合利用。本发明包括以下步骤：1、将组分IV沉淀溶解后压滤分离得到滤液A；2、边搅拌滤液A边加入聚乙二醇，压滤分离，得到滤液B；3、调整滤液B的pH，控制滤液B的温度，压滤分离，得到滤液C；4、边搅拌滤液C边加入聚乙二醇，得到反应液C，压滤分离，得到沉淀；5、沉淀溶解，进行DEAE Sepharose fast flow弱阴离子交换层析，超滤；6、将超滤液中的蛋白浓度稀释后加入辛酸钠，调整pH至6.8～7.0，除菌过滤、巴氏灭活，得到人血白蛋白成品。

主权项

一种人血白蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）组分IV沉淀溶解：以人血浆分离的废弃物组分IV沉淀为起始原料，将组分IV沉淀投入0.01~0.03mol/L、pH值6.8~7.4的Tris‑HCl缓冲液中得到反应液A，调整反应液A的pH为6.8~7.4，控制反应液A温度为‑1~1℃，搅拌溶解后压滤分离，得到滤液A；2）边搅拌滤液A边加入分子量为3000~4000的聚乙二醇，使聚乙二醇浓度为8~14%（质量/体积），得到反应液B，调整反应液B的pH至6.0~6.5，控制反应液B温度为‑1~1℃，搅拌混合后静置沉淀，压滤分离，得到滤液B；3）调整滤液B的pH至5.5~5.8，控制滤液B的温度为‑1~1℃，搅拌混合后静置沉淀，压滤分离，得到滤液C；4）边搅拌滤液C边加入分子量为3000~4000的聚乙二醇，使聚乙二醇浓度为20~25%（质量/体积），得到反应液C，调整反应液C的pH至4.8~5.2，控制反应液C的温度为‑1~1℃，搅拌混合后静置沉淀，压滤分离，得到沉淀；5）沉淀用0.01mol/L、pH值6.8~7.4橼酸钠‑NaCl缓冲液溶解，得到沉淀溶解液，调节沉淀溶解液的pH为6.8~7.4后进行DEAE Sepharose fast flow弱阴离子交换层析，收集洗脱液进行超滤，得到超滤液；6）收集超滤液，将超滤液中的蛋白浓度稀释至20%（质量/体积）后加入辛酸钠，使辛酸钠的浓度为0.16~0.18mmol/g蛋白质，调整pH至6.8～7.0，用除菌滤器过滤后60±0.5℃连续10小时恒温巴氏灭活，再次除菌滤器过滤，得到人血白蛋白成品。