[发明专利]一种重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母生产脂肪酶的方法

摘要

本发明公开了一种重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母生产脂肪酶的方法，具体步骤如下：重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母GS115接种于种子培养基培养，再接种于发酵培养基BSM中发酵；待发酵培养基甘油耗尽，补加补料培养液；当细胞湿重达到350g/L以上，停止补加补料培养液；待甘油耗尽，流加诱导培养液，流加量为1-3ml/L.h，控制培养温度为22-26℃，诱导培养；离心，得到含有脂肪酶的上清液。本发明通过采用缺失了AOX1基因的重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母生产脂肪酶，该菌株对甲醇的消耗和溶氧的需求较小，能够减轻动力负荷，能耗少，节省原材料成本，便于控制，利于工业生产。

主权项

一种重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母生产脂肪酶的方法，其特征在于，具体步骤如下：1）重组Muts型甲醇营养型毕赤酵母GS115接种于种子培养基中培养，再接种于发酵培养基BSM中；2）通气搅拌发酵，发酵过程中溶氧控制在20‑40%，加入氨水调节pH5‑6；3）发酵培养基甘油耗尽，补加补料培养液，维持溶氧20‑35%；4）细胞湿重达到350g/L以上，停止补加补料培养液；5）待甘油耗尽，流加诱导培养液，流加量为1‑3ml/L.h，控制培养温度为22‑26℃，氨水调节pH6，诱导培养；6）6000rpm离心10min，得到含有脂肪酶的上清液。