[发明专利]一种载脂蛋白B的快速纯化方法有效
| 申请号： | 201210259252.7 | 申请日： | 2012-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN102766205A | 公开（公告）日： | 2012-11-07 |
| 发明（设计）人： | 李光飞;曹玉珍 | 申请（专利权）人： | 深圳市宝凯仑科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/775 | 分类号： | C07K14/775;C07K1/14 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所 44248 | 代理人： | 胡吉科 |
| 地址： | 518109 广东省深圳市宝安*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种载脂蛋白B的快速纯化方法，包括步骤：A）取人血浆，加入缓冲溶液稀释并混匀；B）将得到的稀释血浆样品置于65~75℃的第一水浴中加热后，离心，取上清液；C）往上清液中加入0.5~3%体积分数的表面活性剂，混匀，得到处理后的上清液；D）将处理后的上清液置于50~60℃的第二水浴中加热后，离心，弃上清液，收集沉淀；E）将沉淀用0.01~0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液洗涤两次，抽滤，得到纯化后的载脂蛋白B。本发明提供的载脂蛋白B的快速纯化方法操作步骤简单，所需设备简单，纯化后的产物纯度高，有效降低了纯化成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂蛋白 快速 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种载脂蛋白B的快速纯化方法，其特征在于：包括如下步骤：A）取人血浆，加入缓冲溶液稀释并混匀后得到稀释血浆样品；B）将所述稀释血浆样品置于65~75℃的第一水浴中加热，期间每隔5分钟轻轻混匀所述稀释血浆样品一次，水浴加热15~25分钟后，将所述稀释血浆样品于7500~8500g条件下离心10~20分钟，取上清液；C）往所述上清液中加入0.5~3%体积分数的表面活性剂，混匀后静置3~5小时，得到处理后的上清液；D）将所述处理后的上清液置于50~60℃的第二水浴中加热，期间每隔5分钟轻轻混匀所述处理后的上清液一次，水浴加热10~30分钟后，将所述处理后的上清液于7500~8500g条件下离心10~20分钟，弃上清液，收集沉淀；E）将所述沉淀用0.01~0.1mol/L的Tris‑HCl缓冲液洗涤两次，抽滤，得到纯化后的载脂蛋白B。
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